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PCR檢測方法兩項團標征求意見

行業標準 2023年03月20日 13:36:06來源:儀表網 24846
摘要近日,由華南農業大學負責起草的《產酸克雷伯桿菌 PCR 檢測方法》和《奇異變形桿菌 PCR檢測方法》編制完成并征求意見。

  【儀表網 行業標準】近日,由華南農業大學負責起草的《產酸克雷伯桿菌 PCR 檢測方法》和《奇異變形桿菌 PCR檢測方法》編制完成并征求意見,請研究提出修改意見,并填寫《廣東省動物學會團體標準征求意見反饋表》,于2023年4月17日前通過郵件反饋至gdsdongwuxuehui@163.com。
 
  聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)是體外酶催化合成特異 DNA片段的方法,模板DNA先經高溫變性成為單鏈,在DNA 聚合酶作用和適宜的反應條件下,根據模板序列設計的兩條引物分別與模板DNA兩條鏈上相應的一段互補序列發生退火而相互結合,接著在 DNA 聚合酶的作用下以四種dNTP為底物,使引物得以延伸,然后不斷重復變性、退火和延伸這一循環,使欲擴增的基因片段以幾何倍數擴增。
 
  《產酸克雷伯桿菌 PCR檢測方法》
 
  本文件規定了實驗動物大小鼠產酸克雷伯桿菌的PCR檢測方法。本文件適用于實驗動物大小鼠產酸克雷伯桿菌核酸定性檢測。
 
  用合適的方法提取樣本中的DNA,分別針對病原菌16s RNA或其他保守的基因設計特異的引物,通過PCR對模板進行擴增,根據PCR反應結果分析該樣品中是否含有某種病原菌。
 
  儀器設備
 
  1PCR儀。
 
  2電泳儀
 
  3凝膠成像分析系統。
 
  4普通離心機。
 
  5恒溫孵育器。
 
  6漩渦振蕩儀。
 
  7組織勻漿器。
 
  8生物安全柜。
 
  9超凈工作臺。
 
  10冰箱(-20C)。
 
  11冰箱(-80C)。
 
  12微量移液器:0.1 uL~2.5uL,1 uL~10 uL,10 uL~100 uL,20 uL~200 uL,100 uL~1000 uL。
 
  13采樣工具:剪刀、鑷和滅菌棉拭子等。
 
  《奇異變形桿菌 PCR 檢測方法》
 
  本文件規定了實驗動物大小鼠奇異變形桿菌的PCR檢測方法。本文件適用于實驗動物大小鼠奇異變形桿菌核酸定性檢測。
 
  用合適的方法提取樣本中的DNA,分別針對病原菌16s RNA或其他保守的基因設計特異的引物,通過PCR對模板進行擴增,根據PCR反應結果分析該樣品中是否含有某種病原菌。
 
  儀器設備
 
  1PCR儀。
 
  2電泳儀。
 
  3凝膠成像分析系統。
 
  4普通離心機。
 
  5恒溫孵育器。
 
  6漩渦振蕩儀。
 
  7組織勻漿器。
 
  8生物安全柜。
 
  9超凈工作臺。
 
  10冰箱(-20°C) 。
 
  11冰箱(-80°C)。
 
  12微量移液器: 0.1 uL~2.5 uL, l uL~10 uL,10 uL~100 uL,20 uL~200 uL,100 uL~1000 uL。
 
  13采樣工具:剪刀、鑷和滅菌棉拭子等。
 

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