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細胞培養常見三種類2022/10/05

一、動物細胞培養在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。常見的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等作為支持物。⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節，不斷維持所需要的氣體條件。[2]二、植物細胞培養⑴光照：離體培養的植物細胞對光照條件不甚嚴格，因為細胞生長所需

細胞復蘇及傳代處理2022/09/26

細胞處理：1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：1）.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2）.加2ml消化液（0.25%T

?影響菌株質量的因素2022/09/19

⒈赭曲霉價格培養基構成孢子培養基的原材料，其產地、品種、加工方法和用量對孢子質量都有一定的影響。為了保證孢子培養基的質量，斜面培養基所用的主要原材料，糖、氮、磷含量需經過化學分析及搖瓶發酵試驗合格后才能使用。制備培養基時要嚴格控制滅菌后的培養基質量。斜面培養基使用前，需在適當溫度下放置一定的時間，使斜面無冷凝水呈現，水分適中有利于孢子生長。⒉培養溫度和濕度微生物在一個較寬的溫度范圍內生長。但是，要獲得高質量的孢子，其適溫度區間很狹窄。一般來說，提高培養溫度，可使菌體代謝活動加快，縮短培養時間，但

化學試劑純化的方法2022/09/13

大家在化學分析、儀器分析、無機制備、有機合成以及其他的科學實驗工作中經常會遇到所用的化學試劑純度不夠，或買不到所需純度的化學試劑，這就需要在實驗室自己對現有的化學試劑進行純化，以便得到所需純度的化學試劑。實驗室中常用的純化化學試劑的方法主要有：蒸餾和精餾、重結晶、萃取、區域熔融和色譜分離等，下面一起來看看吧！蒸餾和精餾：使用廣泛的純化方法，根據液體混合物中液體與蒸汽之間混合組分的分配差別進行純化，是純化揮發性和半揮發性化學試劑的第一選擇。蒸餾和精餾的實際應用：蒸餾和精餾主要用于液體、或是加熱可成

歸納胎牛血清與新生牛血清的區別2022/09/05

胎牛血清是實驗室里細胞培養中用量最大的天然培養基，因為胎牛從未接觸過外界，而使得其血清中所含的抗體和補體幾乎沒有對細胞有害的成分。并且高質量的胎牛血清含有的豐富營養成分可以滿足細胞生長需求，在應用于動物細胞的體外培養中發揮出重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢？想知道兩者之間都有哪些區別不妨看看以下歸納的幾點內容：1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛，所以胎牛血清的采集工作，便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們在未發育*的胎牛的心臟進行穿刺取血，完成采

選購試劑盒的要求與注意事項2022/08/30

一、選購試劑盒的要求：1．所采用的測定方法特異性好，靈敏度、準確度、精密度符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO等推薦的方法性能。2．試劑盒的儲存期至少為1年。3．水溶性、低粘性、無腐蝕、無毒害、不爆炸、不易燃、不污染環境。4．所用標準品或標準參考物符合衛生部臨床檢驗中心、IFCC、WHO推薦的標準和要求。二、選購試劑盒的注意事項：1．要仔細閱讀試劑盒的說明書，對試劑盒選用方法有所了解，科學研究工作時應選擇參考方法試劑盒，醫療預防工作應選擇推薦的常規方法試劑盒，或選擇*的測定方法試劑盒。此外，

介紹三種特異性RNA酶抑制劑2022/08/22

下面介紹３種廣泛應用的特異性RNA酶抑制劑：1、RNA酶的蛋白質抑制劑是從人胎盤分離的一種蛋白質可與多種RNA酶緊密結合（KI≈3x1010）形成非共價結合的等摩爾復合物，使RNA酶失活。此蛋白質體內可能是血管生成素的抑制劑，血管生成素是氨基酸序列和推測的三級結構與胰RNA酶類似的一種血管生成因子，幾個以不同的商品名出售這種抑制劑，該蛋白質應置于含5mmol/L二硫蘇糖醇（DTT）的50％甘油中，貯存于－20℃。抑制劑制品凍融數次后或放置在氧化條件下即應棄之不用，因為上述處理會使蛋白質變性從而釋

分享HRP標記抗體的方法2022/08/15

HRP標記抗體的方法酶與抗體交聯的方法有許多種,根據酶的結構不同可采用不同的方法。對于制備HRP結物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。戊二醛二步法1.原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。2.標記步驟：(1)稱取HRP25mg溶于1.25％戊二醛溶液中，于室溫靜置過夜。(2)反應后的酶溶液經SephadexG-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml／1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，

ELISA間接法實驗操作步驟2022/08/08

ELISA間接法實驗操作步驟:1、抗原包被過夜（12h以上）：IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度（N為板數）2、封閉：棄上清加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。3、洗滌：用洗滌液洗3次4、加一抗(待測樣品為細胞培養上清)：將含單克降抗體的細胞培養上清100μL/孔加到已包被的板上，空白培養基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。測

對照品跟標準品的區分2022/08/01

一、對照品與標準品定義：對照品是指用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標準物質，采用化學方法來測定，即是一般儀器的都叫做對照品。分為標準品和工作對照品，試劑公司買的不能作為正常的對照品使用，必須經過標定之后才可使用。標準品，即標準物品，是中藥標準對照品研究中心代理的作為一種衡量標準。二、內標物能*溶解于樣品中，且不與待測組分發生化學作用;峰位盡可能與待測組分的峰位靠近，但能與待測組分*分開(分離度R≥1.5)的純物質，就叫做內標物。對照品：用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標準

免疫組化技術的特點優勢2022/07/25

應用免疫學及組織化學原理，對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。免疫組化技術的特點優勢如下：1、特異性強免疫學的基本原理決定了抗原與抗體之間的結合具有高度特異性，因此，免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示，如角蛋白（keratin）顯示上皮成分，LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時才會出現交叉反應。2、敏感性高在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制，只有直接法、間接法等敏感性不高的技術，

ELISA試劑盒變質原因2022/07/18

ELISA試劑盒變質是ELISA實驗中比較常見的問題，那么，ELISA試劑盒變質的一些原因現為大家詳細分析下。1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結果的穩定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。2、樣本因素標本干擾因素包

關于菌種名詞基本概念2022/07/12

菌種基本概念：1、新鞘氨醇單胞菌多少錢菌群：由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。2、菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。3、是細菌基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體，與同屬內其他種有著明顯差異；當涉及到細菌保存時，菌種是指細菌的種子（用來長期保存）資源。4、菌型：同一菌種的不同細菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型

紋香茶菜E標準品特點優勢2022/07/05

紋香茶菜E標準品特點優勢：1.國內對照品行ye領導zhe，長達14年對照品的專業及標準制定2.高效穩定的專li純化技術-高速逆流色譜技術的運用3.*的高速逆流色譜對照品中心及中心，保證對照品的質量可控性及批量的穩定性4.嚴格的質量控制，通過全面的檢測（1HNMR13CNMRMSHPLC）5.部分對照品已獲得國家質量監督檢驗檢疫總局頒發的標準物質證書6.完善的庫存及供應體系，所有產品均能現貨供應7.高效的銷售團隊，99%的咨詢可即時回復，即時的報價、優勢的價格、快速的發貨。

重鏈抗原性不同各類抗體的主要功能2022/06/28

抗體依據重鏈抗原性的不同分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。各類抗體主要功能有：1、IgG：血清中含量最高，因此是最重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG還能激活補體，結合并增強巨噬細胞的吞噬功能（調理作用和ADCC效應），穿過胎盤，保護胎兒及新生嬰兒免受感染。2、IgA：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。3、IgM：是分子量最大，體內受感染后最早產生的抗體，具有很強的激活補體和調理作用，因此是重要的抗感染因子

夾心 ELISA 檢測操作步驟2022/06/21

夾心ELISA測定兩層抗體（捕獲抗體和檢測抗體）之間的抗原。目標抗原必須包含至少兩個能夠結合到抗體的抗原表位。單克隆或多克隆抗體均可在夾心ELISA系統中用作捕獲抗體和檢測抗體。單克隆抗體識別單一表位，可對抗原中微小差別進行定量檢測。多克隆抗體通常用作捕獲抗體以沉降盡可能多的抗原。夾心ELISA省去了分析之前的樣品純化步驟，而且提高了分析靈敏度（靈敏度比直接或間接ELISA高2-5倍）。夾心ELISA程序可能難以優化，應使用已測試的匹配抗體對。這樣可確保抗體檢測靶蛋白上的不同表位，而不會干擾其它

細胞培養注意要點小結2022/06/14

細胞培養注意要點小結：1.買細胞要去靠譜的地方買，比如ATCC或者素冉生物。一般上面會有針對細胞的介紹，這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。2.不管是買的細胞，還是別人惠贈的細胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存，凍存細胞復蘇后第二天*更換一次培養基。3.發現細胞有污染迅速處理掉，特別是當你養了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發現，支原體污染的話，細胞會長的慢，可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。4.不同細胞生長周期不同。有的生長很

大鼠視網膜色素上皮細胞處理操作說明2022/06/10

大鼠視網膜色素上皮細胞處理操作說明：1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：1）.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2）.加

小鼠主動脈組織提取物?操作流程2022/06/07

小鼠主動脈組織提取物操作流程：1.1產品僅用于科研主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本olympusimt-413），co2孵箱（日本yamatoit-61）。1.2細胞的復蘇培養傳代及凍存：1.2.1細胞的復蘇培養從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液,以1×1

總結細胞生長緩慢的原因2022/05/31

解析細胞生長緩慢的原因1、培養基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。通常情況下，當小伙伴購買細胞，并沒有按照ATCC或國內細胞庫的方法制備培養基，使用實驗室兄弟姐妹使用的培養基來培養細胞。解決方法一般是按照的方法制備培養基，或直接購買培養細胞的培養基。2、細菌、支原體、真菌等污染。雖然培養基中通常添加雙抗體(和)，但如果無菌操作觀念不強，仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞，可以丟棄污染細胞。當然，丟棄并不是隨意的，扔進垃圾桶。應按照實驗室生物安全規定進行。然后復蘇培養物，建議培養箱*消毒。如