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貨號 | FS-X10305 |
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中文名稱:HDAC1和HDAC3抑制劑(Vorinostat)
英文名稱:Vorinostat
產品規格:1mL(10mM)|250mg|500mg|1g|5g
貨號:FS-X10305
產品介紹:
英文名稱:Vorinostat 產品規格:1mL(10mM)|250mg|500mg|1g|5g Vorinostat是一種有效的HDAC1/3抑制劑,IC50值分別為10nM和20nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:149647-78-9 別名:SAHA 純度:99.90% 分子量:264.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
瘦受體抗體Human PIK3C2B 角蛋白20(CK-20)
枯草芽孢桿菌項韌帶彈性蛋白抗體Human PIK3IP1 角蛋白20(CK20)
粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) 角蛋白19(CK-19)
香菇轉化生長因子β結合蛋白4抗體Human PIK3C2B 角蛋白18-M65(CK 18-M65)
香菇G蛋白偶聯受體69BHuman PIK3IP1 角蛋白18-M30(CK 18-M30)
草青霉李斯特菌菌體蛋白抗體Human PIK3C2G 角蛋白18(CK-18)
假單胞菌屬Rho的鳥核交換因子12抗體Human PILRA 角蛋白17(CK17)
果生鏈核盤菌白血病相關蛋白5抗體Human PIGB 角蛋白13(CK-13)
三棱孢小囊菌富含亮重復蛋白62抗體Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) 間粘附分子3(ICAM-3/CD50)
氏假單胞菌淋巴磷蛋白磷相關蛋白抗體Human PI3K p55(gamma) 間粘附分子2(ICAM-2/CD102)
解淀粉周培瑾氏菌含亮神經膠質瘤失活蛋白4抗體Human KLB(Beta-klotho) 間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
皺曲毛殼淋巴性白血病相關序列1抗體Human PIF1 間粘附分子1(ICAM-1)
鼠乳桿菌L-瓜抗體Human PICK1 性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)
釀酒酵母半胱蛋白抗體Human PIGK 相關蛋白A(CagA)
釀酒酵母乳脫氫D抗體Human PIG3 (CTX)
福氏志賀氏菌蛋白激LYK5抗體Human PIGA 凋亡抑制因子(IAP)
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質量規格:>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖
彎孢單頂孢Monacrosporium│gampsosporum 質量規格:>98.0%(HPLC)(N)吳茱萸次堿
小單孢菌Micropolyspora│sp. 質量規格:>90.0%(HPLC)吳茱萸堿
HDAC1和HDAC3抑制劑(Vorinostat)鼠李糖乳桿 2--3-甲基-5-溴吡啶球蛋白G4
原小單孢 2-氟-5-溴苯白喉A片段
中慢生華癸根瘤 2--4-甲氧基苯酰基轉移
巨型艾美耳球蟲 3--4-氟苯乙酮神經生長因子前體
高地芽孢桿 2蛋白激R-A
土曲霉 三膽固酯轉移蛋白
產堿假單胞 脫氧腺二鈉組三聚體核結合蛋白2
布雷正青霉 異基二二甲酯干擾誘導蛋白激
美澳型核果褐腐病 馬來二辛酯2,3-雙加氧2
黏結珊瑚狀放線 2,3,6-三吡啶腫瘤壞死因子α誘導蛋白6
栗疫 2--4-心肌肌凝蛋白抗體
木耳 2--4,6-二苯基嘧啶巨蛋白抗體
巨大芽孢桿 N-(2-乙基)鄰苯二甲酰亞3-乙
香菇 2-氨基-5-溴苯乙酮白介8受體α
土生叢毛單胞 1,3,5-三噻烷白介20受體
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