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VEGFR2抑制劑(Vandetanib)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 13:28:05瀏覽次數:170次

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貨號 FS-X10396
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中文名稱:VEGFR2抑制劑(Vandetanib)

英文名稱:Vandetanib

產品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg

貨號:FS-X10396

產品介紹:

英文名稱:Vandetanib

產品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg

Vandetanib是一種有效的VEGFR2抑制劑,IC50值為40nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:443913-73-3

別名:ZD6474

純度:99.89%

分子量:475.35

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

普通鏈孢囊菌增食欲B/欲激BAnti-ACSL4 Antibody凋亡相關因子(Fas)

根瘤菌鳥脫羧抗體Anti-ACSL5 Antibody凋亡相關蛋白激(DAPK)

厚垣孢普可尼亞菌O位N-乙酰葡萄糖OGT抗體Anti-ACTA1 Antibody凋亡相關半胱肽4(Casp4)

糙皮側耳、平菇(可訂購)少突膠質轉錄因子1Anti-ACTN3 Antibody凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)

副凝聚短狀桿菌陰離子轉運蛋白-1抗體Anti-ACTN3 Antibody凋亡蛋白激活因子1(APAF1)

產硫球鏈菌陰離子轉運蛋白-3抗體Anti-ACVR2A Antibody凋亡蛋白活化因子1(APAF-1)

尖鐮孢 黃瓜專化型催產受體(縮宮受體)抗體Anti-ACTN3 Antibody(PB1079)淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)

黃單胞菌緊密連接蛋白抗體Anti-ACTN4 Antibody淀粉樣前體蛋白(βAPP)

大腸埃希菌卵巢癌免疫反應抗原抗體Anti-ACVR2B Antibody電子轉運黃蛋白-泛醌氧化還原/電子轉運黃蛋白脫氫(ETFDH)

樹舌大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體Anti-ADA Antibody電子轉移黃蛋白β肽(ETFB)

相思根瘤菌神經叢蛋白B1抗體Anti-ADA Antibody電壓門控通道抗體(VGKC-ab)

狹檐薄孔菌磷化蛋白激C(T410)抗體Anti-ADA Antibody(PB0960)電壓門控通道(VGKC)

產黃纖維單胞菌磷化蛋白激C mu型抗體Anti-ADAM10 Antibody第八因子相關抗原(FⅧAg)

擬鬼傘磷化蛋白激C mu型抗體Anti-ADAM15 Antibody第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的磷(PTEN/MMAC1)

托魯斯山鏈霉菌表面受體PILRβ抗體Anti-ADAM17 Antibody抵抗樣分子β(RELM-β)

斯氏艾美耳球蟲前列腺癌相關蛋白4抗體Anti-ADAM17 Antibody抵抗(RETN)

成團泛菌Pantoea│agglomerans 質量規(guī)格:>98%

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規(guī)格:>98%,BR

南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質量規(guī)格:>98%,BR
VEGFR2抑制劑(Vandetanib)小孢毛霉 Acemetacin5羥色2B受體

鹽古桿 1-羥基芘硫轉移pi基因

蘇云金芽孢桿 天青AS轉移

枯草芽孢桿 2-溴-6-色P4503A1

大腸埃希氏 N-乙基哌孕烷X受體

東邊纖細芽孢桿 2,3,4,6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖蛋白磷

卡察夫氏弧 胱抑

玫瑰產色鏈霉 4-氨基-6-嘧啶腺A1受體

孔雀石(綠)鏈霉 4,6-二-5-嘧啶甲腺A2A受體

大腸埃希氏 Prednisone血管緊張Ⅱ受體2

小笠原德克斯酵母 托品白介17A

芽孢桿 1-芐基-2-吡咯烷酮血小板內皮粘附分子1

尖孢鐮孢 2,4-二甲C型鈉尿肽

大腸桿 氟PKA-Cα

鞘氨單胞 萘AS-D-乙酯PKA-Cβ

 


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