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mTOR抑制劑(Deforolimus)

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:49:36瀏覽次數:203次

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貨號 FS-X10701
mTOR抑制劑(Deforolimus)正在熱銷的產品:CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體33-炔 97%
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SDF-1a/CXCL1

產品介紹:

Deforolimus是一種有效和選擇性mTOR抑制劑,在HT-1080細胞中抑制S6磷酸化的IC50值為0.2nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:572924-54-0

別名:AP23573;MK-8669;Ridaforolimus

純度:98.46%

分子量:990.21

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:mTOR抑制劑(Deforolimus)

英文名稱:Deforolimus

產品規格:10mg|50mg

貨號:FS-X10701

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

香菇角蛋白18抗原(C端)Anti-CDH7 Antibodyp53上調凋亡調節因子(PUMA)

彩色豆馬勃角蛋白14抗原Anti-CDH6 Antibodyp21蛋白激活激4(PAK4)

解淀粉芽胞桿菌角蛋白16抗原Anti-CDK10 AntibodyO-巖藻糖肽3-β-N-乙酰基葡萄糖轉移(RFNG)

蠟狀芽孢桿菌角蛋白17抗原Anti-CDK1 AntibodyO-唾液糖蛋白內肽(OSGEP)

黑木耳角蛋白1/8/19抗原Anti-CDH9 AntibodyOtubain2蛋白(OTUB2)

微球菌角蛋白2抗原Anti-CDH8 AntibodyOtubain1蛋白(OTUB1)

枯草芽孢桿菌角蛋白5抗原Anti-CDK11B AntibodyOsterix蛋白(OSX)

忠清南道鹽單胞菌角蛋白7抗原Anti-CDK1 AntibodyOpiorphin蛋白(OPI)

芽孢桿菌角蛋白8(多肽)Anti-CDK2 AntibodyO-6-甲基鳥DNA甲基轉移(MGMT)

綠木霉酪蛋白激2相互作用蛋白1抗原Anti-CDK20 AntibodyN-乙酰轉移9(NAT9)

慕尼黑分枝桿菌鈣激活離子通道4抗原Anti-CDK2AP1 AntibodyN-乙酰轉移8樣蛋白(NAT8L)

枯草芽孢桿菌c-mer原癌基因酪激抗原Anti-CDK2AP2 AntibodyN-乙酰轉移8B(NAT8B)

豬丹絲菌c-Myc tag標簽多肽Anti-CDK2AP1 AntibodyN-乙酰轉移8(NAT8)

魯氏毛霉AU5 tag標簽抗原Anti-CDK5R2 AntibodyN-乙酰轉移6(NAT6)

淺黃色假單胞菌AU1 tag標簽多肽Anti-CDK5R1 AntibodyN-乙酰轉移5(NAT5)

絲球毛霉Glu-Glu Tag多肽蛋白Anti-CDK5RAP2 AntibodyN-乙酰轉移2(NAT2)

原鈣粘蛋白γB6抗體肺炎鏈球菌小鼠腦神經膠質母細胞

原鈣粘蛋白γC3抗體化膿性鏈球菌人外周血單核細胞

原鈣粘蛋白γC4抗體陰溝腸桿菌陰溝亞種小鼠肺泡巨噬細胞

妊娠區帶蛋白PZP抗體嗜熱脂肪地芽孢桿菌人皮膚成纖維細胞
mTOR抑制劑(Deforolimus)孟氏假單胞 三苯基鉍肌酐

綠粘帚霉 1,1'-聯-2-萘肌酐

黑曲霉 (R)-(-)-2,3-二氨基鹽鹽一氧化氮合成

短波單胞 對氨基水楊鈉脂肪

地衣芽孢桿 對氨基偶氮苯主要組織相容性復合體

土壤成對桿 三叔丁骨成型蛋白

枯草芽孢桿 2,3-戊二酮氨基

冷桿屬 4-肉桂抗壞血

葡萄座腔 D-(-)-泛酰內酯Bcl2樣蛋白11

玉大斑 N,N-二甲基乙一磷腺

鮑魚側耳 甲基脲谷氨酰半胱合成

農藥殘留速測儀(農卡) 4-溴-2-甲氧基苯c-Jun氨基末端激1

香菇 D-叔丁酯鹽鹽凋亡誘導因子

腐皮鐮孢 二巰基腺病1型

丁香暗黃鏈霉 2-苯并惡唑啉酮腺病2型

 


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