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2OG oxygenase抑制劑(IOX1)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 16:38:58瀏覽次數:220次

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貨號 FS-X11014
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中文名稱:2OG oxygenase抑制劑(IOX1)

英文名稱:IOX1

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X11014

產品介紹:

IOX1是2OG oxygenase高效廣譜抑制劑,包括JmjC去甲基化酶家族,對KDM4A和KDM3A的IC50值分別為0.6uM和0.1uM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:5852-78-8

純度:97.04%

分子量:189.17

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)

黑曲霉Pseudomonas fluorescens大鼠環孢A(CsA)

桿狀毛霉Pseudomonas fluorescens大鼠環孢A(CsA)

波氏假性阿利什霉Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)

三葉草根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)

洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)

金福菇Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)

壁芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠抗內膜抗體(EMAb)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Pseudomonas fluorescens大鼠抗內膜抗體(EMAb)

裂褶菌Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)

釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)

草木樨中華根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)

平菇(PL185)Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)

大豆慢生根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)

沃氏富鹽菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)

油菜假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)

早老蛋白-1抗體苜蓿莖點霉超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)

突觸后密度蛋白95抗體污黑腐皮殼總超氧化物歧化(T-SOD)比色法測試盒(羥胺法)

一種腫瘤抑制基因抗體N端禾谷鐮孢菌還原(GR)比色法測試盒

甲狀旁腺激相關蛋白抗體三隔鐮刀菌總超氧化物歧化(SOD)比色法測試盒(WST-1 法)
2OG oxygenase抑制劑(IOX1)乳桿屬 泰樂

平沙綠僵 復合蛋白保護劑HPD

絲軸黑粉* 復合蛋白保護劑DSP50

金產色鏈霉 復合蛋白保護劑DP7

大腸埃希氏 復合蛋白保護劑DP4

孢淡灰鏈霉 蛋白保護劑AEP-HBC

草青霉 (S)-2-苯基甘甲酯鹽鹽

腐皮鐮孢 (L)-2-甲

淺紫灰鏈霉淺紫灰亞種 叔丁氧羰基-L-谷5叔丁脂

灰褐牛肝 BOC-L-谷5芐脂

害艾美耳球蟲 Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱

Lonsdalea quercina subsp. iberica BOC-S-Trityl-L-半胱

解淀粉周培瑾氏 芴甲氧羰基-L-天冬β-叔丁酯

犁形馬勃 Boc-L-天冬4-環己酯

杰丁塞伯林德納氏酵母 顯軸買麻藤

 


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