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貨號 | FS-X10764 |
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中文名稱:MEK小分子抑制劑(CI-1040)
英文名稱:CI-1040
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10764
產品介紹:
CI-1040(PD184352)是高度特異的MEK小分子抑制劑,對MEK1的IC50值為17nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:212631-79-3 別名:PD 184352 純度:99.72% 分子量:478.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
新月彎孢Anti-HNRNPA0 pAb人抗肌動蛋白抗體(AAA)
長孢鏈霉菌Anti-hnRNP L Antibody人抗肌動蛋白抗體(AAA)
黃絮鱗鵝膏菌Anti-HNRNPD Antibody人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)
運動替斯崔納菌Anti-HNRNPC Antibody人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)
水棲黃桿菌Anti-HNRNPD Antibody人蛋白3抗體(PR3Ab)
檸檬色短小桿菌Anti-HNRNPD(AUF1) pAb人蛋白3抗體(PR3Ab)
葡萄座腔菌Anti-HNRNPM Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)
緣彎孢Anti-HNRNPH1 Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)
木糖氧化無色桿菌Alexa Fluor 350標記兔IgG(流式同型對照)Anti-HNRNPH2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
牛病性腹瀉病熒光Cy3標記兔抗FITCAnti-HNRNPLL Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
異常漢遜酵母熒光PE-Cy3標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-HORMAD1 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
枯草芽孢桿菌熒光PE-Cy3標記羊IgG(流式同型對照)Anti-HNRNPUL2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
球形芽胞桿菌熒光Cy3標記羊抗人IgAAnti-HNRNPUL2 Antibody人抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)
多主葡萄殼菌Alexa Fluor 350標記羊IgG(流式同型對照)Anti-HOXA7 Antibody人抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)
土曲霉Alexa Fluor 350標記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-HNRPLL Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)
伊氏利斯特氏菌生物標記牛血清白蛋白Anti-HOXB1 Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)
PSD95結合蛋白2抗體產黃青霉人腎上腺皮質腺癌細胞
PSD95結合蛋白4抗體阿達青霉人胰腺癌細胞系
SCK蛋白抗體棉鈴蟲擬青霉大鼠甲狀腺細胞
神經組織特異性F肌動蛋白結合蛋白2抗體玫煙色擬青霉彌漫大B細胞淋巴瘤細胞
MEK小分子抑制劑(CI-1040)韋斯特迪克氏曲霉 RV肉湯雌二
腐爛粘束梗霉 瓊脂培養基N(溴化十六烷基三瓊脂)黃體生成
樟疫霉 溴化十六烷基三瓊脂孕酮
球孢白僵 檢定培養基1號(高PH)促卵泡
產氨短桿 D-阿洛糖雌二
弓形蟲(RH株) 支原體瓊脂培養基睪酮
新城疫病 麥康凱肉湯催乳
長柄條孢牛肝 BBL液體培養基乳糖
黑曲霉 GN糜蛋白
大腸埃希氏 1-甲酰胰蛋白
香菇 蛋白胨緩沖液顆粒酪蛋白αs1
木耳屬 MLCB寒天培地顆粒酪蛋白β
丁香假單胞 瓊脂培養基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂)κ酪蛋白
構巢曲霉 腸道富集肉湯培養基(USP)雌
靈芝屬 (S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二促腎上腺皮質
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