13524666654
當前位置：上海撫生實業有限公司>>生化檢測試劑盒>>三羧酸循環系列>> αKGDHα酮戊二酸脫氫酶紫外分光光度法
| 貨號 | FS-01S63458 |
|---|
公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒，質量信得過產品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。
產品名稱：αKGDHα酮戊二酸脫氫酶檢測試劑盒紫外分光光度法
規格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
貨號：FS-01S63458
商品介紹：
測定意義 α-KGDH（EC 1.2.4.2）廣泛存在于動物、植物微生物和培養細胞的線粒體中，是三羧酸循環調控關鍵酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔酶。 測定原理 α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶生成琥珀酰輔酶、 二氧化碳和 NADH，NADH在340 nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、細胞或組織樣品的制備： 培養細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。 |
生長因子受體結合蛋白10(Grb10)聯免疫試劑盒匍枝根霉原變種PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
生長因子受體結合蛋白14(Grb14)聯免疫試劑盒白僵mTOR (7C10) Rabbit mAb (PE Conjugate)
生長因子受體結合蛋白2(Grb2)聯免疫試劑盒香菇—五香1號DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
生長因子受體結合蛋白7(Grb7)聯免疫試劑盒釀酒酵母DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
食欲B/阿立新B(OXB)聯免疫試劑盒猴假單胞DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjugate)
視黃誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)聯免疫試劑盒 奇異球Atg2A Antibody
視網膜母瘤蛋白1(RB1)聯免疫試劑盒 盤孢Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb
視網膜母瘤抑制蛋白(PRB)聯免疫試劑盒 釀酒酵母Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb
嗜環蛋白/親環A(CYPA)聯免疫試劑盒 鍺栓孔Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAb
嗜環蛋白/親環B(CYPB)聯免疫試劑盒 芽胞桿Animal-Free Blocking Solution (5X)
嗜環蛋白/親環D(CYPD)聯免疫試劑盒 中國臺灣根霉Animal-Free Blocking Solution (5X)
神經纖維網蛋白2(NRP2)聯免疫試劑盒蘋果落葉交鏈孢霉DAPT
檸檬合(CS)聯免疫試劑盒假單胞屬Actinomycin D
8-羥基鳥糖苷1(OGG1)聯免疫試劑盒 硬結節桿Carfilzomib
嗜粒趨化因子受體(ECFR)聯免疫試劑盒 根瘤His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
αKGDHα酮戊二酸脫氫酶檢測試劑盒紫外分光光度法自噬相關蛋白18抗體Human MARVELD3 ELISA Kit人補體7（C7）ELISA試劑盒,
自噬相關蛋白4A抗體Human MAS1L ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體（OLAb）ELISA試劑盒,
載脂蛋白A4抗體Human MAST1 ELISA Kit兔子γ干擾（IFN-γ）ELISA試劑盒,
12脂氧合抗體Human MAST3 ELISA Kit間粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA試劑盒--動物，人
血管緊張III抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit多肽YY（Peptide-YY）ELISA試劑盒--動物，人
腺苷環化3抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit抗中性粒/中心體抗體（ACA）ELISA試劑盒--動物，人
血管動蛋白抗體Human Caspase 12 ELISA Kit艾柯病IgM（ECHO IgM）ELISA試劑盒--動物，人
腺病早期E1A蛋白抗體Human CD320 ELISA Kit糖蛋白130（gp130）ELISA試劑盒--動物，人
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
儀表網