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貨號 | FS-X10577 |
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產品介紹:
GSK2879552是一種不可逆的LSD1抑制劑,具有抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1401966-69-5 純度:99.82% 分子量:364.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:LSD1抑制劑(GSK2879552)
英文名稱:GSK2879552
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10577
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
類干酪乳桿菌基質衍生因子1抗體Anti-PAK1 Antibody磷張力蛋白同源物(PTEN)
扶桑本森頓酵母SET結合蛋白1抗體Anti-PAK1 Antibody磷甲羥戊激(PMVK)
小孢毛霉生長抑受體3抗體Anti-PAK1 Antibody磷肌-3-激催化亞基δ肽(PIK3Cδ)
鹽古桿菌鋅指轉錄因子Slug抗體Anti-PAK3 Antibody磷肌-3-激催化亞基β肽(PIK3Cβ)
蘇云金芽孢桿菌胚胎干抑制蛋白Suz12抗體Anti-PAK6 Antibody磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)
枯草芽孢桿菌神經突觸1抗體Anti-PAK5 Antibody磷核糖甲酰甘脒合(PFAS)
大腸埃希氏菌磷化神經突觸1抗體Anti-PANX2 Antibody磷核糖甘酰轉甲酰基(GART)
東邊纖細芽孢桿菌磷化神經突觸1抗體Anti-PAPPA Antibody磷核糖咪唑羧化(PAICS)
卡察夫氏弧菌酪蛋白激Fyn(同步原癌基因)抗體Anti-PAPPA Antibody磷甘油酯激2(PGK2)
玫瑰產色鏈霉菌頂端體相關蛋白7抗體Anti-PAR4/Pawr Antibody磷甘油酯激1(PGK1)
孔雀石(綠)鏈霉菌血清應答因子結合蛋白1抗體Anti-Parkin(PARK2) Antibody磷甘油脫氫(PHGDH)
大腸埃希氏菌磷化血清應答因子抗體Anti-PARK7 Antibody磷甘油變位5(PGAM5)
小笠原德克斯酵母應激誘導磷蛋白1抗體Anti-PARK7 Antibody(PB0341)磷甘油變位4(PGAM4)
芽孢桿菌14號染色體開放閱讀框174Anti-PARK7 Antibody磷甘油變位1(PGAM1)
尖孢鐮孢中斷位點蛋白STIL抗體Anti-PARP2 Antibody磷甘露糖1(PMM2)
大腸桿菌紡錘體組裝異常蛋白6抗體Anti-PARN Antibody磷甘露糖1(PMM1)
谷受體NMDAζ1抗體布氏檸檬桿菌人角膜上皮細胞提取物
谷受體NMDAζ2抗體施氏葡萄球菌施氏亞種人體角膜成纖維細胞提取物
去甲腎上腺轉運蛋白/神經遞質去甲腎上腺轉運體抗體糊精片球菌人腦靜脈血管內皮細胞提取物
還原型輔Ⅱ氧化5/腺二核磷抗體產硫球鏈菌人腦靜脈血管平滑肌細胞提取物
LSD1抑制劑(GSK2879552)墳墓節桿 2-溴芐硫章魚
根瘤 2,6-二氟-3-(易)組
枯草芽孢桿 苯并環-1-羧二
蘇云金芽胞桿 3,3,5,5-四甲基環己酮超氧化物歧化
枯草芽孢桿 (R)-3-異基哌-2,5-二酮總抗氧化能力
豚雙歧桿 基化鉑酰基合成
窄脊正青霉 乙酰酮鎳二水合物Ca-ATP
乳桿屬 Dihydroquinidine半乳糖
金針菇(毛柄、冬菇) 1,3-二溴-5-氟苯β半乳糖
根瘤 1,2-二-4-氟苯半胱蛋白-3
曲霉 3,5-二氟苯B瘤因子2
少根根霉 2,7-二溴-9-芴酮Bcl-2相關X蛋白
意大利青霉 3-氨基色P450氧化
串珠鐮孢 磷-d3蛻皮
德爾布有孢圓酵母 1-乙基-3-甲基咪唑醋鹽胰島受體
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