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特異性雌激素作用抑制劑

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更新時間:2022-05-18 10:59:04瀏覽次數(shù):163次

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貨號 FS-X10285
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中文名稱:特異性雌激素作用抑制劑

英文名稱:Fulvestrant

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10285

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:Fulvestrant

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

Fulvestrant是一種有效的特異性雌激素作用抑制劑,作用于雌激素受體(Estrogen Receptor),IC50為9.4nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:129453-61-8

別名:ICI 182780;ZD 182780;ZD 9238;ZM 182780

純度:99.89%

分子量:606.77

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

慢生根瘤菌胰島樣生長因子結(jié)合蛋白樣1抗體Human PTBP2 抑瘤M(OSM)

嗜松青霉免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體Human PSTPIP1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)

膠孢IV型己糖激抗體Human PTBP1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)

大腸埃希氏菌宿主免疫球蛋白lambda樣肽1抗體Human PTCD3 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)

美澳型核果褐腐病菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human PTCH1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)

灰略紅鏈霉菌NF-kappa-B抑制子epsilon抗體Human PTCH2 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)

棱柱散尾菌中華變型絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTAFR 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)

日內(nèi)瓦毛霉纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體Human PTBP1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)

朱紅栓菌絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTBP2 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)

慢生根瘤菌肽酰tRNA水解ICT1抗體Human PTCD3 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)

解脂亞羅酵母alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27抗體Human PTCH1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)

弗氏檸檬桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白81抗體Human PTCH2 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)

鴨疫里氏桿菌Gamma干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PSME4 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)

焦曲霉異檸檬脫氫3 beta亞基抗體Human PSME3 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)

貽貝弧菌干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體Human PSMF1 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)

蘇云金芽孢桿菌異檸檬脫氫gamma亞基抗體Human PSMG2 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)

: B687資源名稱: 熒光假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)白花前胡

: T.6757F3資源名稱: 傷門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(R型)人參皂Rh2

酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:用于高效液相色譜標(biāo)記仙茅
特異性雌激素作用抑制劑葡萄汁有孢漢遜酵母 Alpha-(二正丁甲基)-2,7-二芴-4-甲骨髓源性生長因子

河生萊略特氏 4,6-二羥基煙乙酯核轉(zhuǎn)錄因子

彎曲假單胞 1-溴-3--2-甲基烷環(huán)氧合

擬可可毛球二孢 5-氨基-2-磺酰環(huán)氧合

皮狀假絲酵母 6-氨基-1-甲基-5-亞硝基抗糖蛋白抗體

空腸彎曲桿 2-甲氧基苯肼鹽鹽磷脂酰肌二磷

冷解糖芽孢桿 芐三氟化絡(luò)合物尿鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1

異常漢遜酵母 吡啶三唑酮低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白

鏈霉 1-(3-甲氧基苯基) 哌 脂肪合成

雞傳染性法氏囊病陽性血清  2,6-二溴-4-乙酰羥化

蕈狀芽孢桿 2-溴-5-甲色羥化2

塔賓曲霉 2--1- (4-基)-1-酮5-羥色轉(zhuǎn)運(yùn)體

土生類諾卡氏 4-羥基芐黑色瘤標(biāo)記物

釀酒酵母 4-氨基-6-甲氧基嘧啶傷門氏

焦曲霉 3-苯甲3-磷甘油脫氫

 


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