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MCA線粒體檸檬酸檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 14:51:04瀏覽次數:117次

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貨號 FS-01S63469
MCA線粒體檸檬酸檢測試劑盒微量法公司正在出售的產品:Lasiodiplodin
氯化肉豆蔻酰膽
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Lethedioside A
Polyphyllin D

商品介紹:

測定意義

CA是線粒體三羧酸循環的第一個中間產物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環強度的主要指標之一。

配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環進行狀況。

測定原理:

CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進一步與苯肼反應,生成相應的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒,質量信得過產品,售后完善。服務于高校及免疫學科研單位,竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。

產品名稱:MCA線粒體檸檬酸檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63469
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

犬白介8(IL-8)聯試劑盒Anti-INTS2 Antibody熒光Cy3標記豬IgG

γ干擾(IFN-γ)聯試劑盒Anti-IPO9 Antibody熒光Cy3標記水貂IgG

犬轉化生長因子β1(TGF-β1)聯試劑盒Anti-IPMK Antibody熒光Cy3標記兔IgM

犬白介6(IL-6)聯試劑盒Anti-IPPK Antibody熒光Cy3標記大鼠IgM

犬白介10(IL-10)聯試劑盒Anti-IPPK Antibody熒光Cy3標記重組白介-1受體拮抗劑

犬腫瘤壞死因子α(TNF-α)聯試劑盒Anti-IRF1 Antibody熒光Cy3標記血藍蛋白

犬血管內皮生長因子(VEGF)聯試劑盒Anti-IQCB1 Antibody熒光Cy3標記雞卵白蛋白

犬纖維蛋白原(Fbg) 聯試劑盒Anti-IRF4 Antibody熒光Cy3標記血白蛋白

犬脂聯(ADP/Acrp30)試劑盒Anti-IQGAP3 Antibody熒光Cy3標記胰糜蛋白

犬補體因子3(C3)聯試劑盒Anti-IRS1 AntibodyAlexa Fluor 555標記羊IgG(流式同型對照)

犬轉鐵蛋白(TRF)試劑盒Anti-IRX1 AntibodyAlexa Fluor 555標記大鼠IgG(流式同型對照)

犬結合珠蛋白(HP)聯試劑盒Anti-IRX2 Antibody熒光PE-Cy7標記兔IgG(流式同型對照)

犬絲蛋白抑制因子肽抑制因子進化枝A成員1(SERPINA1)聯試劑盒Anti-IRX3 Antibody辣根過氧化物標記生物

犬球蛋白E(IgE)聯試劑盒Anti-ISL2 Antibody(親和純化) 牛IgG

犬球蛋白G(IgG)聯試劑盒Anti-ITGA2 Antibody熒光標記牛血清白蛋白
MCA線粒體檸檬酸檢測試劑盒微量法血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體Human TUBGCP3 ELISA Kit對基-α-D-吡喃葡萄糖苷

谷脫羧67抗體Human TWSG1 ELISA Kit尿激

生長抑制DNA損傷基因45抗體Human DNM2(Dynamin-2) ELISA Kit

胃泌抑制肽抗體Human TUSC4 ELISA Kit吲哚

葡萄糖轉運蛋白4抗體Human C19orf80(Betatrophin) ELISA Kit胞嘧

磷脂酰基蛋白聚糖-3抗體Human TTK ELISA Kit5二磷三鈉鹽

糖皮質受體抗體Human TTL ELISA Kit2′-脫氧腺苷-5′-二磷二鈉鹽

胰高血糖樣肽-1抗體Human TUSC5 ELISA Kit藍(水溶)

 


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