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ELISA檢測試劑盒免疫測定有哪些?2021/07/21
ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應(yīng)更換吸嘴,避免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物使用液和底物使用液時可用定量多道加液
梅毒螺旋體(蒼白密螺旋體)PCR試劑盒說明書2021/07/16
1、試劑盒簡介貨為了適應(yīng)梅毒螺旋體(蒼白密螺旋體)PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照OIE國際標準中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表1:s表1:試劑盒組成(50test/盒)操作流程:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品
兔ELISA檢測試劑盒操作步驟2021/07/07
兔ELISA檢測試劑盒基本原理:1.抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。兔ELISA檢測試劑盒操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量
有關(guān)科研抗體常見的問題解答2021/06/30
1.做流式的抗體和免疫組化的抗體是一樣的嗎?不一定能通用。流式是用直接標記還是間接標記?如果是直接標記的話,那這個抗體一般不是FITC標記或者就是TRITC,PE之類的。如果恰好你的免疫組化,也是想用熒光素標記的抗體來直接標記,那就可以通用。如果你的免疫組化要用其它的標記的話,或者是間接標記的話,就有麻煩,因為熒光素的標記很可能會影響二抗和一抗的結(jié)合。2.為什么我的抗體做WB非常好,而做不了IF,IHC等其他任何實驗?首先恭喜你有一個WB非常好的抗體,畢竟能獲得做WB非常好的抗體也不容易。其次,
介紹提取總蛋白和膜蛋白方法2021/06/23
膜蛋白具有多種功能,在細胞識別、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、運輸?shù)扔兄兄匾慕巧虼艘彩莏i佳的藥物靶點。抽提膜蛋白主要是進行蛋白組分析:常用的實驗是非變性膠電泳、酶活分析、SDS-PAGE、westernblot等。本文敘述了總蛋白的抽提方法、和膜蛋白的提取方法。一、從新鮮樣品中提取總蛋白(簡易法)1.自配裂解液(pH8.5-9.0):50mMTris-HCl,2mMEDTA,100mMNaCl,0.5%TritonX-100,調(diào)pH值至8.5-9.0備用;用前加入100μg/ml溶菌酶,1μl/ml
收到細胞后的處理步驟方法2021/06/17
收到細胞后的處理步驟方法:1.收到細胞,第一時間要鏡檢:調(diào)查細胞形態(tài)是否正常,關(guān)于貼壁細胞則要留意看貼壁狀況是否很好,調(diào)查細胞密度,有疑議及時咨供給細胞的技術(shù)人員。由于運送的時間或許溫度的改變,許多貼壁細胞在盛滿培育基的瓶子里成長的狀況平和時會有點不一樣,主要是貼壁結(jié)實問題。比如293T,平常貼壁就不是很牢,在裝滿的培育基瓶子里邊,會發(fā)生大片的脫落,細胞集合在一起,但是細胞成長還是正常的,經(jīng)過離心搜集,加以胰酶的消化,從頭打散,又能夠正常的貼壁成長。2.當經(jīng)過上一步的調(diào)查,細胞初步?jīng)]有任何問題時
介紹正確清洗ELISA酶標板方法2021/06/09
正確地清洗酶標板是成功完成ELISA實驗的關(guān)鍵之一。稀釋濃縮洗滌液時應(yīng)使用去離子水或蒸餾水。使用多通道移液器首先,檢查酶標板確保其牢固放置于板架上。隨后,翻轉(zhuǎn)酶標板傾倒液體。按照說明書所示體積在每孔加入洗滌液。按照推薦的時間,計時器設(shè)置洗滌液浸泡時間。再次翻轉(zhuǎn)酶標板倒出液體,用干凈的吸水紙輕拍,將孔內(nèi)液體拍干。按照說明書建議的次數(shù)重復(fù)以上步驟。最后一次在吸水紙上拍干后迅速進行下一步操作。避免孔內(nèi)液體自然風(fēng)干。使用多管道分液器或洗板機使用與分液器或洗板機配套的真空泵。確保每個通道的分液管道和吸液管
熒光定量PCR試劑盒概述2021/05/26
RealTimePCREasyTM-SYBRGreenI試劑盒提供的2×RealPCREasyTMMix-SYBR是一種使用SYBRGreenI進行RealTimePCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。2×RealPCREasyTMMix-SYBR包含本公司*的熱啟動ForegeneTaqDNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、
酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟與特性2021/05/17
酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水
豬ELISA試劑盒無菌操作事項2021/05/11
豬ELISA試劑盒操作事項:1.豬ELISA試劑盒玻璃器皿的消毒和清潔新購玻璃器皿的處理新購玻璃器皿應(yīng)用熱番筧水洗刷,流水沖刷,再用1%~2%鹽酸溶液浸泡,以除去游離堿,再用水沖刷。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等,經(jīng)清水洗凈后應(yīng)注入濃鹽酸少量,漸漸轉(zhuǎn)動,使鹽酸布滿容器內(nèi)壁數(shù)分鐘后傾出鹽酸,再用水沖刷。2.污染玻璃器皿的處理①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%shi炭酸浸泡,再煮沸30分鐘,亦可用番筧或合成洗刷劑洗刷使盡量發(fā)生泡沫,然后用清水沖刷至無番筧停止。然后用少量蒸餾水沖刷。②細
進口elisa試劑盒操作步驟方法2021/04/28
進口elisa試劑盒操作步驟:實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加9
大鼠檢測試劑盒測定步驟方法2021/04/27
大鼠檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法:1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。
植物標準品儲存辦法的條件2021/04/22
植物標準品儲存條件:僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保
人elisa定量檢測試劑盒的技術(shù)原理2021/04/21
人elisa定量檢測試劑盒技術(shù)原理:(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。(2).結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3).酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。(4).受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。(5).此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。(6).加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測
豬ELISA試劑盒技術(shù)的服務(wù)2021/04/16
豬ELISA試劑盒技術(shù)原理:(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。(2).結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3).酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。(4).受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。(5).此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。(6).加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具
檢測elisa試劑盒技術(shù)原理的夾心法2021/04/14
檢測elisa試劑盒雙抗體夾心法(檢測未知抗原):1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃1
豚鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法方法2021/04/02
豚鼠ELISA試劑盒雙抗體夾心法(檢測未知抗原):1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃1
其他類ELISA試劑盒的客戶須知內(nèi)容2021/03/31
其他類ELISA試劑盒雙抗體夾心法:1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
原代細胞的二點操作步驟2021/03/26
原代細胞操作步驟:1、貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀
外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體制備幾點過程2021/03/23
外胚層發(fā)育不良蛋白1抗體實驗原理:(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎
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