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| 產(chǎn)品名稱 | JM109 感受態(tài)細胞 100ul*20 |
| 包裝 | 100ul*20 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
OPG 大鼠骨保護素 規(guī)格： 48T/96T
GAD-Ab 大鼠*脫羧酶自身抗體 規(guī)格： 48T/96T
OFQ/N 大鼠孤腓肽 規(guī)格： 48T/96T
Lebtospira 大鼠鉤端螺旋體IgG 規(guī)格： 48T/96T
T 大鼠睪酮 規(guī)格： 48T/96T
u-T4 大鼠高敏甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T
U-TSH 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素 規(guī)格： 48T/96T
HGF 大鼠肝細胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T
SCFR 大鼠干細胞因子受體 規(guī)格： 48T/96T
SCF/MGF 大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T
IP-10/CXCL10 大鼠干擾素誘導蛋白10 規(guī)格： 48T/96T
CR 大鼠鈣結合蛋白 規(guī)格： 48T/96T
CAM 大鼠鈣調素 規(guī)格： 48T/96T
CaN 大鼠鈣調磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
CAMK 2 大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2 規(guī)格： 48T/96T
CPSA 大鼠復合前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T
sIgA 大鼠分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
SP-A 大鼠肺表面活性物質相關蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
DPPⅣ 大鼠二肽基肽酶Ⅳ 規(guī)格： 48T/96T
CA 大鼠兒茶酚胺 規(guī)格： 48T/96T
DAT 大鼠多巴胺轉運蛋白 規(guī)格： 48T/96T
D2R 大鼠多巴胺D2受體 規(guī)格： 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受體 規(guī)格： 48T/96T
D1R 大鼠多巴胺D1受體 規(guī)格： 48T/96T
DA 大鼠多巴胺 規(guī)格： 48T/96T
TE 大鼠端粒酶 規(guī)格： 48T/96T
M-AChR 大鼠毒蕈堿型乙酰*受體 規(guī)格： 48T/96T
AZT 大鼠* 規(guī)格： 48T/96T
AIF 大鼠凋亡誘導因子 規(guī)格：
3-氨基-2-甲基吡啶 3430-10-2
5-溴-2-甲基吡啶 3430-13-5
3-氨基-6-甲基吡啶 3430-14-6
3-溴-5-甲基吡啶 3430-16-8
2-溴-3-甲基吡啶 3430-17-9
2,5-二溴-3-甲基吡啶 3430-18-0
3-氨基-5-甲基吡啶 3430-19-1
4-甲基-3-溴吡啶 3430-22-6
3,5-二溴-4-甲基吡啶 3430-23-7
3-氨基-4-甲基吡啶 3430-27-1
3-氯-4-氟環(huán)己醇 34328-61-5
2-哌啶甲醇 3433-37-2
S-叔丁基亞磺酰胺 343338-28-3
2-溴溴芐 3433-80-5
D-* 344-25-2
5-溴-2-硝基三氟甲苯 344-38-7
2-氯-3-硝基吡啶 34515-82-7
5-溴茚酮 34598-49-7
2,5-二溴硝基苯 3460-18-2
4-溴苯甲砜 3466-32-8
2,7-二甲氧基萘 3469-26-9
4-碘吡唑 3469-69-0
6-羥基-1-四氫萘酮 3470-50-6
JM109 感受態(tài)細胞 100ul*20醋酸甲脒 3473-63-0
2-氟苯胺 348-54-9
3,4-二氟溴苯 348-61-8
碳酸鋅 3486-35-9
8T/96T
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。
