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營養鹽瓊脂保存

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Nutrient agar

3-5

按其物理狀態可分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基三類:
1)固體培養基。是在培養基中加入凝固劑,有瓊脂、明膠、硅膠等。固體培養基常用于微生物分離、鑒定、計數和菌種保存等方面。
2)液體培養基。液體培養基中不加任何凝固劑。這種培養基的成分均勻,微生物能充分接觸和利用培養基中的養料,適于作生理等研究,由于發酵率高,操作方便,也常用于發酵工業。
3)半固體培養基。是在液體培養基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態??捎糜谟^察細菌的運動、鑒定菌種和測定噬菌體的效價等方面。培養基按微生物的種類可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基和霉菌培養基等四類。
的步驟:
(一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.88.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
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