醋酸洋紅染色液50ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
SCaBER(人膀胱鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細胞裂解液 (陽性對照)
95-D細胞，人高轉移肺癌細胞 轉血小板基因倉鼠卵巢細胞,CHO-pt細胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細胞*培養基100mL
人真皮微血管內皮細胞-HDMEC
Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml
WM35, 人黑色素瘤細胞
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2
豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5 大鼠肝細胞，BRL 3A細胞 NBLE細胞，新生牛眼晶體上皮細胞
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1
HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人細胞;Hela P10s-11F
MN-s, 小鼠紋狀體神經元
ZR-75-1細胞，導管癌細胞 人絨癌細胞耐藥株,JEG-3/VP16細胞 人氣管平滑肌細胞RNAHTSMC miRNA5 μg
恒河猴腎細胞;MMK3
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit
*還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmatrixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格：96T/48T
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human P-selectin (omentin) ELISA Kit 人網膜素(omentin)ELISA試劑盒
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCathepsinK,cath-KELISA試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒規格：96T/48T
轉基因油菜(canola)RF3品系基因檢測試劑盒20次
Humansignalrecognizationparticleantibody,SRPELISAKit人抗信號識別顆粒抗體(SRP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法人*(FK506)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
