人臍靜脈內(nèi)皮細胞【Human Umbilical: Normal Umbilical Vein Endothelial Cells】 產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產(chǎn)品名稱 | 人臍靜脈內(nèi)皮細胞價格 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963726 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RabbitCoisolELISA試劑盒兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山芝烯三醇 HPLC≥98% 5mg
RabbitCollagenaseIELISA試劑盒兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 商陸黃素 HPLC≥98% 5mg
RabbitCollagenaseTypeIIELISA試劑盒兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 商陸皂甙 B HPLC≥98% 5mg
rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇根亭堿 HPLC≥98% 5mg
rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇莓甙A HPLC≥98% 5mg
RabbitCompleme3,C3ELISA試劑盒兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蛇紋石素 HPLC≥98% 5mg
RabbitCompleme4,C4ELISA試劑盒兔子補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 伸筋草萜寧醇 HPLC≥98% 5mg
RabbitComplemefragme3a,C3aELISA試劑盒兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻環(huán)氧醇苷 HPLC≥98% 5mg
rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 石松醇 HPLC≥98% 5mg
RabbitCrosslaps,CrELISA試劑盒兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 疏展香茶菜寧 A HPLC≥98% 5mg
英文名稱HumanCiliaryNeuroophicFactorELISAkit人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)規(guī)格:96T/48T 去甲白屈菜紅堿 HPLC≥95% 20mg
調(diào)料D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測試劑盒20 表去氫茯苓酸 HPLC≥95% 20mg
Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒大鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 多孔菌酸C HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒 ,英文名: DBP ELISA Kit 二氫齒孔酸 HPLC≥95% 20mg
兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒RabbithighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T α羥基豬苓酸C HPLC≥95% 20mg
牛銅鋅-過氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)試劑盒 Bovine Cu/Zn-Superoxide Dismase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit 表去氫土莫酸 HPLC≥95% 20mg
英文名稱HumanHaptoglobinELISAKIT人結(jié)合珠蛋白(Hpt)規(guī)格:96T/48T 山橘脂酸 HPLC≥95% 20mg
調(diào)料D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20 地芰普內(nèi)酯 HPLC≥95% 20mg
Ratphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISA試劑盒大鼠0酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 筋骨草素F HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 ,英文名: VD3 ELISA Kit 筋骨草素H HPLC≥95% 20mg
人臍靜脈內(nèi)皮細胞價格Rathiston-H2bELISA試劑盒大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 商陸皂甙 B HPLC≥98% 5mg
RatHomocysteicacid,HcyELISAKit大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 商陸黃素 HPLC≥98% 5mg
RatHomocysteicacid,HcyELISA試劑盒大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 珊瑚菜素 HPLC≥98% 20mg
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜素(標準品) phelloptorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 釤標準溶液(1000μg/ml) Samarium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
RatHyaluronicacid,HAELISAKit大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山竹子素 HPLC≥95% 20mg
RatHyaluronicacid,HAELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山茱萸新苷 HPLC≥98% 20mg
RatHydrocoisone,HYDELISA試劑盒大鼠(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山茱萸苷 HPLC≥98% 20mg
Rathydroxyproline,HypELISAKit大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山梔子苷B HPLC≥98% 20mg
Rathydroxyproline,HypELISA試劑盒大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 山梔苷甲酯(標準品) Shanzhiside methylester 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。