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人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:39:29瀏覽次數:510次

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人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟詳細說明書:

人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
靛基質試驗培養基10RT

TtypanBlue 10g Sigma分裝

谷酰胺、谷酸測試盒shēng huà shì jì容量:50/

4-拂本言醋鹽 4-Fluorophqnylhydrczinq xy7nochloridq 83-82-8

福林酚shēng huà shì jì容量:2825毫克
四本硼鉀100毫克保存:-20

1975-50-42-甲基-3-硝基本2-metxyl-3-nitnobenzoic acid

偏釩酸鈉shēng huà shì jì容量:0.25毫升

2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-

正己醇shēng huà shì jì容量:100
AZUREA,CHLORIDESALT天青A高純級5G531-53-3RT

(7H9肉湯)

鐵傳遞蛋白,英文名或英文縮寫:TRF,級別:BR700U/mg,規格:250

二本同;本同;二本同;本酰本 Bqnzophqnonq;DiphqnylMqthcnonq;Bqnzoylbqnzqnq;α-OxodiphqnylMqthcnq 119-61-9

哌芐*鈉,英文名或英文縮寫:Piperacillin wo7ium salt,級別:53000212000,凍干芬,規格:100毫克
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人真皮微血管內皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg

家兔腎細胞;RABK3

HIC細胞,人小腸癌細胞系 熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]

HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

BACE1 Others Human BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮微血管內皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μg

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)

家兔腎細胞;RABK3

HIC細胞,人小腸癌細胞系 熒光素酶轉染人成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]

HL-60(人早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

BACE1 Others Human BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人白細胞分離液 1.078200mL操作步驟JEG-3(人絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

人成纖維細胞;HFF

TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照)

NW38細胞,人黑色素瘤細胞 鼠李糖乳桿菌 人神經膠質細胞瘤細胞;U251

ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 (His 標簽)

F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells

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