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上海莼試生物技術有限公司
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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2大鼠支氣管成纖維細胞操作

大鼠支氣管成纖維細胞操作

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-20 15:08:43瀏覽次數:135次

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大鼠支氣管成纖維細胞操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,375%CO2培養。

產品名稱

大鼠支氣管成纖維細胞操作

規格

T25m2

貨號

CS-963868

大鼠支氣管成纖維細胞【Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblasts產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37 5CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA檢測試劑盒Humangasin-reliasingpeptide,GRP 96T/48T 甲磺酸達氟沙星  Danofloxacin mesylate  質量規格:>98%,BR

人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA檢測試劑盒Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRP 96T/48T 甲磺酸達氟沙星(標準品)  Danofloxacin mesylate  質量規格:HPLC>98%,標準品

人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA檢測試劑盒Humangasincellaibody,GCA 96T/48T 海藻酸鈣  Calcium Alginate  質量規格:AR,99%

人胃粘液素(GM)ELISA檢測試劑盒HumanGasicMucin,GM 96T/48T 美芬諾酮  Mephenoxalone  質量規格:>98%

人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA檢測試劑盒Humanaconitase2,ACO-2 96T/48T 大豆卵磷脂()  Lecithin  質量規格:HPLC>98%,BR

人烯(ACR)試劑盒 Human acrolein,ACR ELISA kit 蛋黃卵磷脂  Lecithin from egg  質量規格:BR

人細胞相關蛋白A(CagA)ELISA檢測試劑盒HumanCytotoxin-associatedprotein,CagA 96T/48T 維蘭特羅  Vilanterol;GW642444  質量規格:>98%,吸入型長效β2激動劑

人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA檢測試劑盒Humancytokeratin18,CK-18 96T/48T PD98059  PD-98059  質量規格:>98%,MEK抑制劑

人細胞角蛋白19(CK-19)ELISA檢測試劑盒Humancytokeratin19,CK-19 96T/48T PLX4720  PLX-4720  質量規格:>98%B-RafV600E抑制劑

人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA檢測試劑盒Humancytokeratin20,CK-20 96T/48T N,N-羰基二咪唑  1,1'-Carbonyldiimidazole  質量規格:>98%
人鈣轉運ATP2C型成員1(ATP2C1)試劑盒 human ATP2C1 ELISA Kit 2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽  2',7'-Dichlorofluorescein  Salt   質量規格:>98%

Ratiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規格:96T/48T 天青I;天青B  Azure I  質量規格:BS

CACNA1G基因化程度定量分析試劑盒20 天青II  Azure II  質量規格:BS

MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA試劑盒小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 天青A  Azure A chloride   質量規格:BS

小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP gp96 ELISA Kit 三氯生  Triclosan  質量規格:>97%,BR

小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T 刃天青/樹脂天青/刃天青鈉  Resazurin  質量規格:BR,美國biofer進分

人鈣粘蛋白相關的神經受體1(C-1)試劑盒 Human C-1 ELISA Kit 天青石藍  Celestine blue  質量規格:BS

Ratiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒規格:96T/48T 天青 B 曙紅  Azure B eosinate  質量規格:sigma分裝

Carnoy固著液50毫升 利馬前列素  Limaprost  質量規格:>99%

MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 天青II曙紅  Azure II eosinate  質量規格:BS
大鼠支氣管成纖維細胞操作大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 Rat heat shock protein 70,hSP-70 ELISA Kit 毛蘭素 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit 96T/48T 毛花苷C TLC95% 20mg

大鼠熱休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)試劑盒 Rat Heat shock protein HSP 90-alpha,Hsp90aa1/Hsp86/Hspca ELISA kit 毛喉帖 J HPLC98% 5mg

大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒 Rat Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit 毛喉帖 G HPLC98% 5mg

大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA檢測試劑盒RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 96T/48T 毛果蕓香堿 HPLC98% 20mg

大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測試劑盒RatHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit 96T/48T 毛果香茶菜醛 A HPLC98% 5mg

大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒 Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit 毛鉤藤堿 HPLC98% 10mg

大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA檢測試劑盒RatChorionicGonadoophin,CGELISAKit 96T/48T 毛萼乙素 HPLC98% 5mg

大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)試劑盒 Rat Chorionic Gonadoophin,CG ELISA Kit 毛萼乙素  Eriocalyxin B  質量規格:HPLC98%,標準品

大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA檢測試劑盒RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 96T/48T 毛萼晶乙 HPLC98% 5mg

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