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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠肺動脈成纖維細胞直銷 | T25m2 | CS-963865 |
大鼠肺動脈成纖維細胞【Rat Lung: Normal Artery Fibroblasts】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA檢測試劑盒Ratgalanin,GAL 96T/48T 馬賽替尼 Masitinib 質量規格:>98%
大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HL 96T/48T 美西林/氮脒青霉素 Mecillinam 質量規格:>95%,BR
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSH 96T/48T 甲羥孕酮/安宮黃體素 Medroxyprogesterone 質量規格:>98%,BR
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4 96T/48T 甲羥孕酮(標準品) Medroxyprogesterone 質量規格:>98%,標準品
大鼠高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3 96T/48T 甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-咪唑 Methimazole 質量規格:>98%,USP 32
大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1 96T/48T 甲巰咪唑(標準品) Methimazole 質量規格:>98%,標準品
大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,T 96T/48T 美索巴莫 Methocarbamol 質量規格:>98.5%,USP 32
大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA檢測試劑盒RatLebtospiraIgG 96T/48T 美索巴莫(標準品) Methocarbamol 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/N 96T/48T 潑尼松龍 Methylprednisolone 質量規格:>97%,BR,可用于細胞培養
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-Ab 96T/48T 潑尼松龍(標準品) Methylprednisolone 質量規格:HPLC>97.5%,標準品
人干擾素活化基因205(Ifi205)試劑盒 human ierferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit 羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G Rhodamine 6G 質量規格:BS
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B 質量規格:BS
C.guilliermondiiRFLP基因分析試劑盒20 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B 質量規格:BS
MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規格:96T/48T 氯化羅丹明110;羅丹明110 Rhodamine 110 chloride 質量規格:>99%
小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 ,英文名: β-CG ELISA Kit 羅丹明123 Rhodamine 123 質量規格:用于熒光標記
小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA檢測試劑盒Mousesolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 96T/48T 曲美布汀堿 Trimebutine base 質量規格:>98%,BR
人干擾素調節因子8(IRF8)試劑盒 Human IRF8 ELISA Kit 6-羧基四羅丹明;6-TAMRA 6-Carboxytetramethylrhodamine 質量規格:≥90%;for fluorescence
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 6-羧基四羅丹明琥珀酯,6-TAMRA, SE 6-TAMRA, SE 質量規格:用于熒光標記
C.kruseiRFLP基因分析試劑盒20 卵清蛋白;雞蛋白蛋白 Ovalbumin/Egg albumins 質量規格:BR,80~90%
MouseLeptin,LEPELISA試劑盒小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 米替福新 Miltefosine 質量規格:>98%,BR
大鼠肺動脈成纖維細胞直銷大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒 Rat prostate specific aigen,PSA ELISA Kit 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg
大鼠前心肽(Pro-ANP)試劑盒 Rat Pro Aial Naiuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR) Dodecyl gallate 質量規格:>98.5%,BR
大鼠潛伏轉化生長因子結合蛋白1(LTBP1)試劑盒 Rat Late-ansforming growth factor beta-binding protein 1,LTBP1 ELISA kit 沒食子酸乙酯 HPLC≥98% 20mg
大鼠強啡肽(Dyn)試劑盒 Rat dynorphin,Dyn ELISA Kit 沒食子酸乙酯 Ethyl gallate 質量規格:>98%,BR
大鼠羥戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit 沒食子酸一水物(標準品) Gallic acid monohydrate 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠羥戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit 沒食子酸一水物 Gallic acid monohydrate 質量規格:>98%,AR
大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA檢測試劑盒Rathydroxyproline,HypELISAKit 96T/48T 沒食子酸辛酯 HPLC≥98% 20mg
大鼠羥脯氨酸(Hyp)試劑盒 Rat hydroxyproline,Hyp ELISA Kit 沒食子酸甲酯(>98%,BC) Methyl gallate 質量規格:>98%,BC
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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