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注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
產品名稱 | 大鼠肺大靜脈平滑肌細胞價格 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963862 |
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞【Rat Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 ,英文名: Hsp-60 ELISA Kit 鹽酸非索非那定 Fexofenadine 質量規格:>98%,BR
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-70 ELISA Kit 尼扎替丁(標準品) Nizatidine 質量規格:HPLC法含量測定
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-90 ELISA Kit 醋谷胺/乙酰谷酰胺(標準品) Aceglutamide 質量規格:含量測定
小鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPβ2 ELISA Kit 蒙脫石(標準品) Montmorillonit 質量規格:鑒別
小鼠熱休克蛋白β6(HSPβ6)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPβ6 ELISA Kit 佛手柑素;香檸檬素;佛手柑亭;香檸檬亭(標準品) Bergamottin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠熱休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPβ8 ELISA Kit 鹽酸羅哌卡因(標準品) Ropivacaine 質量規格:HPLC法含量測定
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP gp96 ELISA Kit 番石榴苷(標準品) Guaijaverin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA檢測試劑盒MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96 96T/48T 恩曲他濱(標準品) Emtricitabine 質量規格:HPLC>99%,標準品
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測試劑盒MouseHeatShockFactor1,HSF1 96T/48T 恩曲他濱 Emtricitabine 質量規格:>99%,核苷逆轉錄酶(NRTI)抑制劑
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit 肌酐(標準品) Creatinine 質量規格:供檢查用
人干擾素誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)試劑盒 Human IFITM1 ELISA kit 醋甲唑胺 Methazolamide 質量規格:≥97.0%,BR
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 醋甲唑胺(標準品) Methazolamide 質量規格:HPLC≥99.0%,標準品
BrdU標記法組織石蠟切片細胞繁殖熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 齊拉西酮 Ziprasidone 質量規格:含量≥99%
MouseLaminin,LNELISA試劑盒小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規格:96T/48T 塞曲司特/西拉達司/塞拉司特 Seratrodast 質量規格:含量≥98.0%
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 ,英文名: LF/LTF ELISA Kit 美托拉宗 Metolazone 質量規格:>99%,BR
小鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAkit 96T/48T 美托拉宗(標準品) Metolazone 質量規格:HPLC≥99.0%,標準品
人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒 Human IP-10 ELISA Kit 西地尼布馬來酸鹽 Cediranib Maleate 質量規格:度> 99%
RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 西他列汀 Sitagliptin 質量規格:>98.5%,BR
C.albicansRFLP基因分析試劑盒20 維達列汀;維格列汀 Vildagliptin 質量規格:>98.5%,BR
MouseLDL-ICELISA試劑盒小鼠低密度脂蛋白復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規格:96T/48T 維達列汀;維格列汀(標準品) Vildagliptin 質量規格:HPLC≥99%,標準品
大鼠肺大靜脈平滑肌細胞價格大鼠胚胎干細胞*培養基100毫升 美商陸酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠皮質醇(Coisol)ELISA檢測試劑盒RatCoisolELISAKit 96T/48T 美曲勃龍(R-1881) Methyltrienolone 質量規格:>98%,BR
大鼠皮質醇(Coisol)試劑盒 Rat Coisol ELISA Kit 美洛昔康(標準品) Meloxicam 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠皮質酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測試劑盒ratCoicosterone,COELISAKit 96T/48T 美洛昔康 Meloxicam 質量規格:>99%
大鼠皮質酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 Rat Coicosterone,CO ELISA Kit 美洛西林鈉(標準品) Mezlocillin 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA檢測試劑盒Ratosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit 96T/48T 美洛西林鈉 Mezlocillin 質量規格:>96%,CP,BR
大鼠葡萄糖-6-0酸酶/葡萄糖-6-0酸酯酶(G-6-Pase)試劑盒 Rat glucose-6-phosphatase,G-6-Pase ELISA Kit 美洛西林 Mezlocillin 質量規格:美國進口
大鼠葡萄糖激酶(GK)試劑盒 Rat glucokinase,GK ELISA Kit 美羅培南碳酸鈉 Meropenem with carbonate 質量規格:美國進口
大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA檢測試劑盒RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 96T/48T 美羅培南鈉鹽 Meropenem Salt 質量規格:美國進口
大鼠葡萄糖轉運蛋白4(GL4)試劑盒 Rat glucose anspoer 4,GL4 ELISA Kit 美羅培南(標準品) Meropenem trihydrate 質量規格:HPLC>98%,標準品,三水合物
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