當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> T25m2大鼠關節軟骨細胞操作
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
大鼠關節軟骨細胞【Rat Bone: Normal Articular Chondrocytes】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠關節軟骨細胞操作 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963860 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBG大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標準品) Minoxidil Sulfate 質量規格:HPLC>98%,標準品
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 咪唑司汀 Mizolastine 質量規格:>98.5%,BR
RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯 Mycophenolate Mofetil 質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養
RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA試劑盒大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標準品) Mycophenolate Mofetil 質量規格:HPLC>98%,標準品
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規格:96T/48T 奈拉濱 Nelarabine 質量規格:>99.0%,細胞培養級
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISA試劑盒大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒規格:96T/48T 醋酸奈西立肽 Nesiritide Acetate 質量規格:>95%
RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30L大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒規格:96T/48T 硫酸奈替米星 Netilmicin Sulfate 質量規格:≥595 µg/mg,BR
RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISA試劑盒大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒規格:96T/48T 硫酸奈替米星(標準品) Netilmicin Sulfate 質量規格:含量測定
RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40L大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規格:96T/48T 制霉菌素 Nystatin 質量規格:USP級,4400u/mg
RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISA試劑盒大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規格:96T/48T 奧氮平 Olanzapine 質量規格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養
小鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 ,英文名: SDH ELISA Kit 利福平(標準品) Rifampicin 質量規格:>98%,標準品
小鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 96T/48T ε-聚賴氨酸 Epsilon Polylysine 質量規格:溶解性數據為19.8,分子量小于5000
人甘氨酸試劑盒 Human Glycin ELISA Kit 普羅雌烯 Promestriene 質量規格:≥99.0%,BR
Ratinsulinaoaibodies,IAAELISAKit大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 波生坦(水合物) Bosentan hydrate 質量規格:≥98.5%(HPLC),BR,一水合物
BrdU標記法組織冰凍切片細胞繁殖NBT顯色檢測試劑盒10/20 波生坦水合(標準品) Bosentan hydrate 質量規格:HPLC≥98%,標準品
MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) Fosaprepitant dimeglumine 質量規格:>99.0%;P/神經激肽受體拮抗劑
小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: CT IgG ELISA Kit 普拉格雷 Prasugrel 質量規格:≥99.0%,BR
小鼠基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 96T/48T 鹽酸可樂定 Clonidine 質量規格:>98.0%,BR
人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒 Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA kit 鹽酸可樂定(標準品) Clonidine 質量規格:HPLC>99%,標準品
RatInsulieceptorβ,ISR-βELISAKit大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規格:96T/48T 2-甲氧基雌二醇(進分) 2-Methoxyestradiol 質量規格:進分,SigmaM6383
大鼠關節軟骨細胞操作大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒 Rat Gelsolin ELISA Kit 孟魯司特鈉 Montelukast 質量規格:>98%,EP7.3,BR
大鼠凝血酶抗凝血酶Ⅲ復合物(TAT-III)試劑盒 Rat thrombin-aithrombin III complex,TAT-III ELISA Kit 孟魯司特醚 Montelukast Ether 質量規格:美國進口
大鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA檢測試劑盒Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T 孟魯司特二環己基胺鹽 Montelukast Dicyclohexylamine Salt 質量規格:美國進口
大鼠凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)試劑盒 Rat thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit 孟魯司特1,2-二醇(非對映) Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers) 質量規格:美國進口
大鼠凝血酶受體()ELISA檢測試劑盒Ratthrombieceptor,ELISAKit 96T/48T 孟加拉玫瑰紅,酸性紅94 Rose bengal 質量規格:AR
大鼠凝血酶受體()試劑盒 Rat thrombin receptor, ELISA Kit 蒙脫石(標準品) Montmorillonit 質量規格:鑒別
大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)試劑盒 Rat prothrombin fragme 1+2,F1+2 ELISA Kit 蒙花苷(標準品) Buddleoside 質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T 蒙花苷 HPLC≥97% 20mg
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)試劑盒 Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 鎂試劑II MagnesonII 質量規格:AR
大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA檢測試劑盒RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 96T/48T 鎂試劑I MagnesonI 質量規格:AR
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。