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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠表皮黑色素細胞說明 | T25m2 | CS-963855 |
小鼠表皮黑色素細胞【Mouse Skin: Normal Melanocytes】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
人β2轉鐵蛋白(β2TF)試劑盒 Human beta 2 ansferrin,β2TF ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質量規格:100μg/ml,u=2%
人β4整合素(ITG β4/CD104)試劑盒 Human ITG β4/CD104 ELISA Kit 滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 質量規格:10μg/ml,u=6%
人β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)試劑盒 Human β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISA Kit 惡草酮(分析標準品,97.5%) Oxadiazon 質量規格:分析標準品,97.5%
人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA檢測試劑盒Humanβ-hexosaminidaseA 96T/48T 嘧啶磷(10μg/ml,u=3%) Pirimiphos-methyl solution 質量規格:10μg/ml,u=3%
人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA檢測試劑盒Humanβ-galactosidase,βGAL 96T/48T 撲滅津(標準品) Propazine 質量規格:分析標準品
人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 Human β-galactosidase,βGAL ELISA Kit 戊炔草胺(標準品) Propyzamide 質量規格:分析標準品
人β-促脂素(β-LPH)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lipoopichormone,β-LPH 96T/48T 腐霉利(標準品) Procymidon 質量規格:分析標準品
人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 吡蚜酮(標準品) Pymetrozin 質量規格:分析標準品
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T 敵稗(分析標準品,98%) Propanil 質量規格:分析標準品,98%
人β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)試劑盒 Human amyloid beta peptide 25-35,Aβ25-35 ELISA Kit 抑霉唑標準溶液(10μg/ml,u=2%) Imazalil solution 質量規格:10μg/ml,u=2%
BRDU(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 氟達拉賓 Fludarabine 質量規格:≥99.0%,BR
MouseIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規格:96T/48T 氟達拉賓(標準品) Fludarabine 質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠神經絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒 ,英文名: NF-L ELISA Kit G-418 硫酸鹽 G-418 disulfate,Geneticin 質量規格:>500U/mg,BR
小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T 埃羅替尼 Erlotinib 質量規格:>99%,BR,細胞培養級
人甘油二酯(DAG)試劑盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) N-Acetyl-cysteine 質量規格:>98%,BR
RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 佐匹克隆 質量規格:>98.5%,BP2009,BR
BrdU標記法細胞繁殖比色法定量檢測試劑盒10/50 佐匹克隆(標準品) 質量規格:HPLC>99%,標準品
MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規格:96T/48T 阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦 Aniracetam 質量規格:≥99%,BR
小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 ,英文名: NF ELISA Kit 阿尼西坦(標準品) Aniracetam 質量規格:>98%,標準品
小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測試劑盒Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T L-谷氨酰胺 L-Glutamine 質量規格:>99%,BR
小鼠表皮黑色素細胞說明大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 Rat annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit 米托蒽醌 Mitoxantrone 質量規格:HPLC>97%,BR
大鼠膜聯蛋白I(ANX-I)試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit 米吐爾(>98%,BC) Metol 質量規格:>98%,BC
大鼠膜聯蛋白IV(ANX-IV)試劑盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit 米替福新(標準品) Miltefosine 質量規格:HPLC≥>98%,標準品
大鼠膜相關0脂酶A2(PLA2G2A)試劑盒 Rat Phospholipase A2, membrane associated,PLA2G2A ELISA kit 米替福新 Miltefosine 質量規格:>98%,BR
大鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 Rat terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 米屈肼(標準品) Mildronate,Meldonium 質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測試劑盒RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T 米屈肼 Mildronate,Meldonium 質量規格:>99%,BR,二水合物
大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)試劑盒 Rat mothers against decapeaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit 米諾地爾葡萄糖苷酸 Minoxidil Glucuronide 質量規格:美國進口
大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒 Rat brain-g peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標準品) Minoxidil Sulfate 質量規格:HPLC>98%,標準品
大鼠腦啡肽(ENK)試劑盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit 米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶 Minoxidil Sulfate 質量規格:>99.0%
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA檢測試劑盒RatNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T 米諾地爾(標準品) Minoxidil 質量規格:含量測定
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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