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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說(shuō)明

小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說(shuō)明

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產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-20 14:24:47瀏覽次數(shù):160次

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小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說(shuō)明收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。

產(chǎn)品名稱

小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說(shuō)明

規(guī)格

T25m2

貨號(hào)

CS-963823

小鼠輸尿管上皮細(xì)胞【Mouse UreterNormal Ureter Epithelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒 ,英文名: TWEAK ELISA Kit 牛磺膽酸鈉  Taurocholic acid  Salt  質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 諾米林(標(biāo)準(zhǔn)品)  Nomilin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMP 96T/48T 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Levistilide A  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 ,英文名: cGMP ELISA Kit 歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Imperatorin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit α-蒎烯  α-pinene  質(zhì)量規(guī)格:GC97%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 β-蒎烯(標(biāo)準(zhǔn)品)  β-pinene  質(zhì)量規(guī)格:HPLC99%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseCyclosporineA,CsA 96T/48T 七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gypenoside XVII  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 ,英文名: CsA ELISA Kit 七葉皂苷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)   Aescinate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠環(huán)胍酸肽(CCP)ELISA試劑盒 ,英文名: CCP ELISA Kit 漆黃素  Fisetin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,BR

小鼠環(huán)加氧酶1(PTGS1)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGS1 ELISA Kit 漆黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Fisetin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒 利福昔明(標(biāo)準(zhǔn)品)  Riimin  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 鹽酸羅匹尼羅  Ropinirole HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%

Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鹽酸羅哌卡因  Ropivacaine    質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一水合物

載玻片細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ropivacaine    質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣  Rosuvastatin Calcium  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ,英文名: STK ELISA Kit 瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)  Rosuvastatin Calcium  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 96T/48T 西他列汀一水  Sitagliptin phosphate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人孤腓肽(OFQ/N)試劑盒 Human orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 西他列汀一水(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sitagliptin phosphate monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 壯觀霉素,鹽酸大觀霉素  Spectinomycin    質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

ATP酶法冰凍切片人體肌肉組織分型染色試劑盒20 壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Spectinomycin    質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠輸尿管上皮細(xì)胞說(shuō)明大鼠0酸化蛋白激酶B(P-PKB)試劑盒 Rat phosphorylated protein kinase B,p-PKB ELISA Kit 歐奕二烯酮 B HPLC98% 5mg

大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA檢測(cè)試劑盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 96T/48T 歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Imperatorin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit 歐前胡素 HPLC98% 20mg

大鼠0酸化縫隙連接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)試劑盒 Rat phosphorylated gap junction protein, alpha 1,43kDa(phosphorylated GJA1)ELISA kit 歐夾竹桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Oleandrin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)試劑盒 Rat phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit 歐夾竹桃苷 HPLC98% 5mg

大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)試劑盒 Rat phospho glycogen syhase kinase 3,pGSK-3 ELISA Kit 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Levistilide A  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 Rat phospho-exacellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A HPLC98% 20mg

大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA kit 女貞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ligustroflavone  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠0酸化胰島素受體(pISR1)試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit 女貞苷 HPLC98% 20mg

大鼠0酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit 女貞甙 HPLC98% 5mg

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