我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠內臟脂肪組織提取物【Fat: Normal Mouse Visceral Fat Derivatives】內臟脂肪組織是人體脂肪中的一種，與皮下脂肪不同，它圍繞著人的臟器，主要存在于腹腔內。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠內臟脂肪組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據到貨時細胞密度，細胞生長狀態等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO2  培養。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基，37℃,5%CO2  培養111664-82-5  Dehydroevodiamine (hydrochloride)  50mg  Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)改良安卡拉痘苗病毒LAMP試劑盒 

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喉癌上皮細胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細胞*培養基 100mL乙酰唑胺Acetazolamide質量規格：>99%

腦膜細胞培養基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質量規格：>98.0%(T)

SCN3B Others Human  SCN3B 細胞裂解液 (陽性對照) 3-溴-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-酮(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質量規格：>98.0%(T)

大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基 100mL4-溴-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 質量規格：>98.0%(HPLC)

BLU-87 膀胱移行細胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二氨基磺酰)-7-(N-肼基羰-N-)氨基-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))
小鼠內臟脂肪組織提取物直銷TMEM27 Others Human  TMEM27 細胞裂解液 (陽性對照) 酸性綠 50 質量規格：BS,進口原裝Lissamine™ Green B

軟骨細胞培養基CM酸性綠A質量規格：BS,>97%,進口分裝Acid Green A

C-33A細胞，子細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-1細胞 表皮角質細胞-胎兒HEK-f焦1酸鉀(>97%,BC)質量規格：>97%,BCPotassium pyrophosphate, tetrabasic

HFSF(胚胎眼鞏膜成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2鎢酸鉀二水(>98%,BR)質量規格：>98%,BRPotassium tungstate, dehydrate

hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 類外周血CD14+單核細胞團塊單一來源，預選型 > 1 mio.cells 脊髓星形膠質細胞RNAHA-sp miRNA5 μg硫酸奎寧水合物(>98%,BR)質量規格：>98%,BRQuinine hemisulfate salt hydrate
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。