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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法

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更新時間:2017-01-21 13:37:38瀏覽次數(shù):670次

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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法溫馨提示:
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4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

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產(chǎn)品名稱EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法
形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系來源于一無精癥男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

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50 次    細胞核蛋白提取試劑盒    
250g    干粉型 SOC 培養(yǎng)基    
1g    二磷酸苷二    
10 次    柱式醬油 DNAout    
L- 胱氨酸    56-89-3    25g
HB2151 菌種    12-218    1mL
100mL    YPG 液體培養(yǎng)基    
1g    環(huán)磷酰胺    
5g    甲基紅    
10mg    親和素    
甘氨酸二肽    556-50-3    10g
桿菌肽溶液 ,100mg/mL    120682-1    1mL
100mg    遺傳 (G418) 干粉    
1.5mL    酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )    
5g    1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷    
1mL    工具酶緩沖液    
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002實驗方法P- 硝基苯基磷酸膽堿    21064-69-7    100mg
小鼠抗 E2 標簽單抗    130587-100    100μL
100 次    植物種屬鑒定 PCR Mix 2    
2.5ku    L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )    
HMCL-005    TE671 subline No.2    人橫紋肌肉瘤細胞    1×106    1ml/T75    1500 元

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