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更新時間:2024-06-19 15:33:30瀏覽次數:708次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
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Seegene公司專注于分子診斷,研發的多重PCR技術,可實現單管多靶標檢測,目前產品涉及傳染病、遺傳學和腫瘤學。該公司擁有duyou的三大核心技術:DPO™、TOCE™和MuDT™,是實現單管多重核酸檢測的三大利器。



01

DPO™技術




1、原理介紹


Dual Priming Oligonucleotide(DPO™)是一種新型的多重靶標擴增引物設計方法,可提高靶標檢測特異性,減少非特異性擴增。該技術可用于“一管多重"檢測,也適用于多重實時PCR檢測。

DPO™引物結構不同于常規引物,由三部分組成。5’端部分相對較長,是引物退火過程中的穩定序列;3端部分相對較短,是引物延伸的決定序列;中間插入的多聚脫氧ganji(Poly-dI linker),將兩端的特異性功能序列連接起來。



PCR過程中,DPO™引物分為兩步退火步驟。較長片段的5’端序列Tm值較高,優先與靶標序列結合,穩定DPO™引物與靶標退火步驟;繼而較短片段的3’端結合至靶標序列上,啟動特異性延伸;而連接5’3’端的Poly-dI linker在引物退火過程中,會形成泡狀結構,可調節DPO™引物的兩步退火過程,確保引物啟動特異性擴增。


2.特點分析

(1)DPO™引物的特殊設計,可阻斷核酸多重反應中非靶標序列的錯誤延伸。在PCR過程中,即使DPO™引物的5’端長片段部分,結合至非靶標序列上,也會因為3’端無法互補配對而無法延伸擴增;DPO™引物的3’端由于片段較短,在退火溫度中,無法單獨結合至非靶標序列上啟動擴增。





(2)DPO™引物的結構特點,使其在較寬的退火溫度范圍內,依然能保持良好的擴增特異性,其允許靶標序列在退火溫度差別近10℃的情況下擴增。

(3)DPO™引物的dute結構,可避免形成引物二聚體和復雜的二級結構、防止多重靶標引物間的競爭,因此可實現單個反應中,多靶標擴增時的等效性和同步性。

(4)綜合以上特點,DPO™技術特別適用于單管多重核酸檢測。





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