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COMT基因敲除HEK293T細胞 廣州鴻程代理

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所  在  地廣州市

更新時間:2024-06-18 10:07:09瀏覽次數:970次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
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基因組編輯突變檢測試劑盒檢測HEK293T細胞基因組編輯突變的效果圖。將HEK293T細胞種于六孔板中,待細胞融合度約80%的時候,轉染24h后消化細胞接種于96孔板中,每孔約3萬個細胞,24h后,棄上清向孔內加入添加了Enzyme Mix的DNA Extraction Solution提取基因組(68°C, 15min; 95°C, 10min)。用BeyoFusionTM Master Mix (2X)擴增靶基因,擴增產物經變性和退火處理后(95°C 5min; 95°C-85°C, 2°C/s; 85°C-25°C, 0.1°C/s),加入1μl T7EI,37°C酶切15min,2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。轉染含有靶向Hace-1基因的guide RNA的質粒時會形成插入或缺失突變,進行基因擴增后,未突變的和突變的基因片段配對會形成不*匹配的雙鏈DNA,被T7EI識別和酶切后,約520bp的退火片段中的不*匹配的雙鏈DNA會被酶切成約290bp和230bp的兩個片段。轉染空載質粒對靶基因沒有影響,不會產生T7EI酶切產生的小片段。

包裝清單:

產品編號產品名稱包裝
D0508S-1DNA Extraction Solution1.2ml
D0508S-2Enzyme Mix100µl
D0508S-3BeyoFusion™ Master Mix (2X)800µl
D0508S-4T7 Endonuclease I25µl
D0508S-510X Detection Reaction Buffer100µl
D0508S-6Control Templates & Primers20µl
D0508S-7Ultrapure Water (DNase/RNase-Free)200µl
說明書1份


產品編號產品名稱包裝
D0508M-1DNA Extraction Solution5ml
D0508M-2Enzyme Mix400µl
D0508M-3BeyoFusion™ Master Mix (2X)1.6ml X2
D0508M-4T7 Endonuclease I100µl
D0508M-510X Detection Reaction Buffer400µl
D0508M-6Control Templates & Primers20µl
D0508M-7Ultrapure Water (DNase/RNase-Free)800µl
說明書1份

保存條件:

-20℃保存,至少一年有效。Enzyme Mix和BeyoFusion™ Master Mix (2X)盡量避免多次反復凍融。

注意事項:

配制細胞裂解液時,DNA Extraction Solution和Enzyme Mix混勻后,應盡快使用,放置太久可能會影響DNA抽提效果。

對于shouci使用本試劑盒的情況,強烈推薦使用本試劑盒提供的Control Templates & Primers作為陽性對照。其PCR產物經變性退火后,可以作為T7 Endonuclease I酶消化的陽性對照。

本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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