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嗜酸性粒細胞稀釋液(計數液)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:04:11瀏覽次數:374次

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貨號 FS-X9923
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中文名稱:嗜酸性粒細胞稀釋液(計數液)

英文名稱:

產品規格:100ml

貨號:FS-X9923

產品介紹:

用途:

用于嗜酸性粒細胞計數

注意事項:

由桃紅等組成。

儲存條件:4℃,6個月

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

腦膜炎奈瑟菌支鏈基轉2抗體Human GSG1L 小鼠層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒

金龜子綠僵菌BCL2相關蛋白A1抗體Human GSPT2 小鼠草膦乙酰轉移(PAT)免疫試劑盒

谷棒桿菌B淋巴瘤蛋白3抗體Human GPRIN3 小鼠不對稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒

釀酒酵母轉錄因子MYB相關蛋白B抗體Human GPS2 小鼠補體因子H(CFH)免疫試劑盒

腐生葡萄球菌腐生亞種防御β1/Defensin β1抗體Human GPSM2 小鼠補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒

釀酒酵母B活化因子受體抗體Human GPX4 小鼠補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒

喜肌費爾酵母TNF家族B激活因子抗體Human GPX7 小鼠補體蛋白5(C5)免疫試劑盒

橄欖鏈霉菌蛇巴曲抗體Human GPX5 小鼠補體蛋白4(C4)免疫試劑盒

青紫黑鏈霉菌大腦蛋白2抗體Human GPX8 小鼠補體蛋白3(C3)免疫試劑盒

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34程序性死亡配體1抗體Human GRAMD1B 小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)免疫試劑盒

乳微桿菌B7-H4抗體Human GRAMD4 小鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒

小馬勃3-2β分泌抗體Human GRB7 小鼠型肝炎抗體(IgG)免疫試劑盒

東方伊薩酵母相關死亡促進因子Bad抗體Human GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) 小鼠激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒

冷湖黃桿菌BaxHuman GRID1 小鼠激(PK)免疫試劑盒

少根根霉程序性死亡配體2抗體Human GPS2 小鼠二酰脫羧,線粒體(MLYCD)免疫試劑盒

解蛋白弧菌膽汁鹽輸出泵/ATP結合盒轉運蛋白11抗體Human GPSM2 小鼠二單酰(malonyl CoA) 免疫試劑盒

44958=JCM12462資源名稱: 氧化假諾卡氏菌 質量規格:純度(銅):52.5~56.5%β葡萄糖試劑盒3,4,5-三氧基

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>99%,BRβ葡萄糖試劑盒3,4,5-三氧基酯

豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質量規格:(Cu):36.0~38.0%,Tech Gradeβ萘試劑盒楊酯
嗜酸性粒細胞稀釋液(計數液)冬蟲夏草 化鉻(III)混合譜系激域樣蛋白

釀酒酵母 西替汀受體TNFRSF結合絲蘇激1

哈茨木霉 2-溴-6-高親和力球蛋白ε受體α亞基

藍綠小四孢 反式茴香腦硫對甲

釀酒酵母 鵝去氧膽紅補體受體1

枯草芽孢桿 2-乙?;?1-甲基吡咯膠質源性連接蛋白

短雙歧桿 和厚樸γ-分泌

西班牙糖絲 大豆元糖還原

匍枝根霉原變種 2-甲氨基嘧啶載脂運載蛋白-1

桂花地霉 2-異基硫雜蒽酮芳香二烷基磷

竹喙球 槐角腮腺炎病抗原

黃柄曲霉 2-萘磺酰蘭尼堿受體2

鮭色鎖擲酵母 醋成纖維生長因子受體3

Deinococcus 5-溴-2-氟-3-吡啶羧甲酯性磷

藤黃孢鏈霉 磷奧他韋酯D

 


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