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貨號 | FS-X10051 |
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培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:天青石藍蘇木素染色液
英文名稱:
產品規格:2×50ml
貨號:FS-X10051
產品介紹:
用途: 常規切片HE染色 注意事項: 天青石藍和明礬蘇木素聯合使用,天青石藍溶液中的高鐵銨可加強蘇木素與細胞核的結合力,具有抗酸作用,自然氧化需要5個月成熟。染色時間一般分別5分鐘。 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
枯草芽孢桿菌6號染色體開放閱讀框199抗體Human WNT2(Protein Wnt-2) 人抗EB病抗體(EBV)免疫試劑盒
總狀毛霉7號染色體開放閱讀框34抗體Human WWC1(Protein KIBRA) 人抗E3泛蛋白連接TRIM21(TRIM21)抗體免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌6號染色體開放閱讀框201抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) 人抗DNAB抗體(anti-DNase B Ab)免疫試劑盒
鏈球菌屬6號染色體開放閱讀框203抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) 人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)免疫試劑盒
微白螺孢菌6號染色體開放閱讀框204抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) 人抗BB抗體(BB-Ab)免疫試劑盒
細鏈格孢6號染色體開放閱讀框206抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) 人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)免疫試劑盒
黑曲霉6號染色體開放閱讀框211抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) 人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)免疫試劑盒
煙曲霉6號染色體開放閱讀框225抗體Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) 人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)免疫試劑盒
乳桿菌屬6號染色體開放閱讀框25抗體Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) 人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒
側耳6號染色體開放閱讀框35抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) 人卷曲蛋白8(FZD8)免疫試劑盒
戴爾根霉6號染色體開放閱讀框52抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) 人聚集蛋白(Agrin)免疫試劑盒
第三梭菌6號染色體開放閱讀框57抗體Human MAP1LC3B(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B) 人巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
棒曲霉6號染色體開放閱讀框58抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) 人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
毛木耳6號染色體開放閱讀框62抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) 人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌6號染色體開放閱讀框70抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) 人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌6號染色體開放閱讀框72抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) 人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質量規格:AR1,4,5-三磷肌試劑盒雞屎藤酯
草菇Volvariella│volvacea 質量規格:IND1,3-二磷甘油試劑盒雞屎藤
擬盤多毛孢Pestalotiopsis│sp. 質量規格:IND1,25二羥基維生D3試劑盒雞屎藤
天青石藍蘇木素染色液黑色附球孢 4-甲硫基芐溶血酰基轉移2
鼠李糖乳桿 4-基芐食道癌相關基因2
布蘭克假絲酵母 4-溴化鎂固調節因子結合蛋白1
細黃鏈霉乳糖變種 2-乙基噻吩乙酰羧化α
蠟狀芽孢桿 環戊CARD結構域的凋亡相關顆粒樣蛋白
羊泰勒蟲(臨潭株-1) 3-羧基-4-氟苯Crk樣蛋白
巴斯德畢赤酵母 碳亞乙烯酯胱抑B
蠟樣芽孢桿 4-氨基-1-叔丁氧羰基催產受體
葡萄座腔 甲-次硫氫鈉加合物接觸蛋白2
Myxococcus sp. 3-芐氧基-2,6-二氟苯胱抑A
舒青霉 5-(4-苯氧基丁氧基)補骨脂(PAP-1)VGF神經生長因子誘導蛋白2
三孢布拉霉 偶氮二甲二叔丁酯延伸蛋白
亞硝鹽對照液 1-BOC-四氫吡咯δ-促睡眠肽
蕈狀芽孢桿 2-二乙氨基乙烷鹽鹽甲型H1N1流感
蘇云金芽孢桿 (2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷磷二酯5
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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