ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Lysinibacillus│macroides 長(zhǎng)形賴氨芽胞桿菌Lysinibacillus│macroides分離基物:樣/養(yǎng)豬場(chǎng)沼氣池沼液斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過(guò)單菌驗(yàn)證的反硝化菌33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Marinobacr│algicola 棲藻海桿菌Marinobacr│algicola分離基物:樣/深層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no南大西洋細(xì)菌821生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Alcanivorax│borkumensis 泊庫(kù)島食烷菌Alcanivorax│borkumensis分離基物:樣/下層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自柴油原油混合富集菌群1001生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Marinobacr│sp. 海桿菌Marinobacr│sp.分離基物:樣/上層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)酶微生物/脂酶（Tween 80）471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Idiomarina│loihiensis 羅伊赫海源菌Idiomarina│loihiensis分離基物:沉積物/TVG沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no海洋細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Sulfitobacr│pontiacus 龐蒂亞克亞鹽桿菌Sulfitobacr│pontiacus分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no生物轉(zhuǎn)化微生物/固氮菌471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Marinobacr│vinifirmus 強(qiáng)酒海桿菌Marinobacr│vinifirmus分離基物:沉積物/TVMC沉積物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no有機(jī)物降解菌/可降解乙醛（已單菌驗(yàn)證）471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Brevibacrium│epidermidis 表皮短桿菌Brevibacrium│epidermidis分離基物:沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自酚富集菌群33生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
DAO人二胺氧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CD97  CD97抗體髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體反式-2,4-癸二烯Mouse CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit  

CD99/E2 antigen  CD99抗體腺苷環(huán)化酶1抗體聚（甲基乙烯基共聚馬來(lái)）Mouse CTLA4 (Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4) ELISA Kit  

Thymosin Alpha-1  胸腺肽α1抗體腺瘤樣息肉抗體聚（甲基乙烯基共聚馬來(lái)）Mouse D2D (D-Dimer) ELISA Kit

T4  甲狀腺素T4抗體溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體環(huán)丁基胺Mouse DAP6 (Death Associated Protein 6) ELISA Kit  

Tie2  血管生成素受體2抗體錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體環(huán)丁基胺Mouse DCN (Decorin) ELISA Kit  

Phospho-Tie2 (Ser1119)  磷化血管生成素受體2抗體磷化間變型淋巴瘤激酶抗體環(huán)丁基胺Mouse DEFa5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit  

Phospho-Tie2 (Tyr992)  磷化血管生成素受體2抗體酰基輔酶A脫氫酶很長(zhǎng)鏈抗體二異Mouse DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit

RARRES1/TIG1  視黃受體應(yīng)答蛋白1抗體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體二異Mouse DHEA-S (Dehydroepiandrosterone sulfate) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)