ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Dietzia│cercidiphylli 連香樹迪茨氏菌Dietzia│cercidiphylli分離基物:沉積物/TVG沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no海洋放線菌471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Microbacrium│oleivorans 食石油微桿菌Microbacrium│oleivorans分離基物:沉積物/重力柱（地質(zhì)）底層樣品凍干物安全等級:1模式菌株:no海洋放線菌471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Roseovarius│aestuarii 潮汐玫瑰變色菌Roseovarius│aestuarii分離基物:沉積物/潮間帶沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Idiomarina│hydrocarbonoclasticus 海源菌Idiomarina│hydrocarbonoclasticus分離基物:沉積物/TVG鈣質(zhì)軟泥凍干物模式菌株:no潛在的無機(jī)污染物降解菌/分離自六價鉻富集菌群821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：≥97%,FG

Thalassospira│permensis 彼爾姆海旋菌Thalassospira│permensis分離基物:沉積物/紅樹林沉積物斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no無機(jī)物抗性菌/耐受孔雀石綠（1000mg/L，單菌驗證）471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Demequina│salsinemoris 鹽木脫醌菌Demequina│salsinemoris分離基物:沉積物/TVG沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的嗜鹽菌/分離自15%鹽濃度富集菌群821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Lysinibacillus│fusiformis 紡錘形賴氨芽孢桿菌Lysinibacillus│fusiformis分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no有機(jī)污染物降解菌/降解二并噻吩472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Bacillus│sp. 芽胞桿菌Bacillus│sp.分離基物:生物樣/黃翅魚腸體內(nèi)容物凍干物模式菌株:no共生微生物/黃翅魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁甘油酯）、蛋白酶、纖維素酶 生物活性微生物/抑制金黃色葡萄球菌（抑菌圈14/20）33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
MAO人單胺氧化酶ELISA試劑盒實(shí)驗原理Thioster-containing protein 1  按蚊硫酯包含蛋白-1抗體ALKB蛋白抗體(R)-(-)-3-甲乙酯Mouse Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit

ERdj5  ERdj5蛋白抗體乙酰輔酶A酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體(R)-(-)-3-甲乙酯Mouse CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit  

thrombin II  凝血酶Ⅱ抗體磷化β-肌動蛋白抗體(R)-(-)-3-甲乙酯Mouse CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit  

phospho-p38MAPK/MAPK14 (pThr180/pTyr182)  磷化p38MAPK抗體磷化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體Thionin perchlorateMouse FNDC5(Fibronectin type III domain-containing protein 5) ELISA kit

Tie1  血管生成素受體1抗體磷化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體噻吩并[3,2-b]噻吩Mouse Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit  

Thy-1/CD90  CD90抗體載脂蛋白D抗體M344Mouse CYP7A1 (Cytochrome P450 7A1) ELISA Kit  

CD93/C1qrp  CD93抗體敏感離子通道1抗體反式-2,4-癸二烯Mouse CCO (cytochrom-oxidase) ELISA Kit

CD94/KLRD1  NK表面抑制性受體CD94抗體雙鏈RNA腺苷脫氨基酶抗體（C端）反式-2,4-癸二烯Mouse CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit  
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)