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改良Lillie-Mayer蘇木素染色液

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 15:26:38瀏覽次數(shù):178次

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貨號 FS-X10044
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TSHR (NT) 促狀腺受體抗體(N端)2-酰吡咯 ≥98%, FG
TSHR 促狀腺受體抗體乳丁酯 98%
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TSLP 胸腺質(zhì)淋巴生成-1抗體四氫噻吩-3

產(chǎn)品介紹:

用途:

常規(guī)組織切片HE染色

注意事項:

蘇木素染色中l(wèi)eagene推薦采用該試劑。無氧化膜,細胞核染色質(zhì)著色深而細微,臨床上常替代Harris蘇木素染色液,染色時間一般3-5分鐘。

儲存條件:室溫,12個月

中文名稱:改良Lillie-Mayer蘇木素染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml

貨號:FS-X10044

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

釀酒酵母C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體Human EFHD2(EF-hand domain-containing protein D2) 人抗磷脂酰抗體(IgG)免疫試劑盒

昆明腐霉陽離子通道相關(guān)蛋白β亞基抗體Human C9orf140(Protein C9orf140) 人抗磷脂酰絲抗體(APSA)免疫試劑盒

瑞士乳桿菌特異性蛋白57抗體Human TNFRSF12A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A) 人抗磷脂酰甘油抗體(IgM)免疫試劑盒

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無菌藥品  無菌檢查(陰性) C型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) 人抗鏈球菌溶血O抗體(IgG)免疫試劑盒

海氏腸球菌腦鈣粘蛋白12抗體Human ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) 人抗鏈激(SK)抗體免疫試劑盒

pK18mobsacB鈣粘蛋白20抗體Human MAPK8(Mitogen-activated protein kinase 8) 人抗連接IgG抗體免疫試劑盒

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小白蘑菇鈣粘蛋白26抗體Human LILRB2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2) 人抗類風濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)免疫試劑盒

香菇Lentinula│edodes (Berk.) Pegler 質(zhì)量規(guī)格:ARⅠ型前膠原C末端肽試劑盒24-乙酰澤瀉F

: Be2/50資源名稱: 弗勞地拘櫞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:BS(生物染色級)Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒澤瀉B

灰略紅鏈霉菌Streptomyces│griseorubens 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒25-脫澤瀉A;澤瀉G
改良Lillie-Mayer蘇木素染色液pDC316 2-(乙基)苯Ia

云芝 1,4-二芐氧基苯拓撲異構(gòu)10

灰樹花孔 3-(二乙基)-1,2-二金黃色葡萄球腸D

土壤薄層 畢卡魯間隙連接蛋白43

總狀毛霉 4-甲基-N-苯基苯乙二Ⅰ

Cerrena unicolor 4-二甲氨基甲狀腺反應(yīng)基因

薄層屬 2--3,6-二氟芐溴Tolloid樣蛋白1

白僵 4-乙基腫瘤調(diào)節(jié)蛋白1

旋絲毛殼 2,6-二-7-脫氮腫瘤調(diào)節(jié)蛋白

黃白生叢赤殼 4-溴甲酯硬纖毛蛋白

蘇云金芽孢桿 2-基呋喃固類生成因子1

尼泊爾正青霉 雙三氟磺酰亞鋰肽基精脫亞氨

嘴突凸臍蠕孢 L-(-)-蘋果二甲酯Ⅺa

枯草芽孢桿 衣康二甲酯IXa

塔賓曲霉 3,4-二氨基噻吩XIIIa

 


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