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貨號(hào)	FS-X9724

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號(hào)
細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒		20T\|50T\|100T	FS-X9724

產(chǎn)品介紹：

細(xì)胞周期(cell cycle)是指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為止的活動(dòng)過(guò)程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期組成。G1 期：細(xì)胞開(kāi)始RNA和蛋白質(zhì)的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S 期：DNA 開(kāi)始合成，這時(shí)細(xì)胞核內(nèi)DNA的含量介于G1 期和G2 期之間。當(dāng)DNA 復(fù)制結(jié)束成為4倍體時(shí)，細(xì)胞進(jìn)入G2 期。G2 期的細(xì)胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì)，直到進(jìn)入M 期。因此，單純從DNA含量無(wú)法區(qū)分G2 期和M 期。一旦有絲分裂發(fā)生，細(xì)胞分裂成兩個(gè)細(xì)胞，這兩個(gè)細(xì)胞或者進(jìn)入下一個(gè)細(xì)胞周期，或者進(jìn)入靜止期(G0期)，而G0 期從DNA含量上同樣無(wú)法與G1 期區(qū)分。因此，整個(gè)復(fù)制周期可以描述為G0/G1、S、G2/M 期。通過(guò)核酸染料PI標(biāo)記DNA,并由流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，可以得到細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的分布狀態(tài)，計(jì)算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在腫瘤病理學(xué)研究中，通常以S 期細(xì)胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標(biāo)。

PI 為插入性核酸熒光染料，能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA 雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合，其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，就可以得到細(xì)胞周期各個(gè)階段的DNA分布狀態(tài)，從而計(jì)算出各個(gè)期的百分含量。PI染色后，假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M 期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA 復(fù)制的S 期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2 之間。

細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒是利用細(xì)胞內(nèi)DNA 能夠和熒光染料結(jié)合的特性，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細(xì)胞儀檢測(cè)的熒光強(qiáng)度也不一樣來(lái)檢測(cè)細(xì)胞周期。

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存。

有效期：一年。

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

胞內(nèi)離子通道蛋白1(CLIC1)英文名：CLIC1 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝500g

胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名：cPLA2 卡爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg

半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名：Gal-3 含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g

半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名：Gal-6S 含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g

半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名：caspase-3 含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g

半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名：Cys-C 鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g

百白破抗體(DPT)英文名：DPT AGXT2L2蛋白抗體包裝25g

白血病抑制因子受體(LIFR)英文名：LIFR β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

白血病抑制因子(LIF)英文名：LIF 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝1g

白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)英文名：ALCAM 二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體包裝250mg

白三烯E4(LTE4)英文名：LTE4 二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體包裝1g

白三烯D4(LTD4)英文名：LTD4 腺苷單磷脫1抗體包裝5g

白三烯C4(LTC4)英文名：LTC4 紅蛋白Ank1抗體包裝1g

白三烯B4(LTB4)英文名：LTB4 腺苷琥珀裂解抗體包裝100g

白介9(IL-9)英文名：IL-9 α1B糖蛋白抗體包裝25g

血管緊張?jiān)贵w骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競(jìng)爭(zhēng)性的 Aurora kinase 抑制劑，作用于 Aurora A，Aurora B 和 Aurora C，IC50 分別
細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結(jié)合珠蛋白

膠孢二氫獼猴桃內(nèi)酯結(jié)核桿IgG抗體

傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子

根霉屬的 4-異喹啉解脲脲原體抗體

猴頭 2-甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合樣金屬蛋白12

色褐鏈霉鹽酸去甲林解整合樣金屬蛋白33

*美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合樣金屬蛋白9

香菇 4，5-二溴-1H-1，2，3-三氮唑金黃色葡萄球腸

魯氏毛霉 1-甲巰基環(huán)基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸A

糾纏青霉 1-羥甲基環(huán)基乙金黃色葡萄球蛋白A

腐皮鐮孢四氟酸亞鐵(II)金葡腸

阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白

淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1

玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白5

乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。