當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96THCBⅡ人膠原蛋白ⅡELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | HCBⅡ人膠原蛋白ⅡELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ, HCBⅡ Elisa Kit |
貨號 | FS-H63433 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Phellinus│laricis (Jaczewski in Pil&aacu;t) Pil&aacu;t 落葉松木層孔菌Phellinus│laricis (Jaczewski in Pil&aacu;t) Pil&aacu;t分離基物:擔子果斜面培養物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Polyporus│picipes Fr. 青柄多孔菌Polyporus│picipes Fr.分離基物:擔子果斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Coprinellus│xanthothrix (Romagn.) Vilgalys Hopple & Jacq. Joh 鬼傘Coprinellus│xanthothrix (Romagn.) Vilgalys Hopple & Jacq. Joh分離基物:子實體斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Brevibacillus│brevis (Migula) Shida et al. 短芽孢桿菌Brevibacillus│brevis (Migula) Shida et al.分離基物:根際土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:no微生物肥料141生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Pilaira│anomala (Ces.) J. Schröt. 沙氏倚囊霉Pilaira│anomala (Ces.) J. Schröt.分離基物:樟子松凋落物斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Fusarium│redolens Wollenw. 芬芳鐮刀菌Fusarium│redolens Wollenw.分離基物:凋落物斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:96%
Lycoperdon│perlatum Pers. 馬勃Lycoperdon│perlatum Pers.分離基物:子實體斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:96%
Ensifer│fredii (Scholla and Elkan) Young 費氏根瘤菌Ensifer│fredii (Scholla and Elkan) Young斜面培養物安全等級:12生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:98%
HCBⅡ人膠原蛋白ⅡELISA試劑盒實驗原理phospho-c-Jun (Ser243) 磷化原癌基因c-Jun抗體磷二氫雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二)鋇 水合物Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit
phospho-c-Jun (Thr93) 磷化原癌基因c-Jun抗體長春胺環烷羧Human HTRA1 (HtrA Serine Peptidase 1) ELISA Kit
phospho-c-Jun (Ser63) 磷化原癌基因c-Jun抗體鹽咪達普利環烷羧Human IL10Rβ (Interleukin 10 Receptor Beta) ELISA Kit
Jun B 活化蛋白激酶B抗體鹽艾司洛爾環烷羧Human IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit
Jun D 活化蛋白激酶D抗體磷喹L-纈氨乙酯鹽鹽Human HYOU1 (Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit
CK I alpha/STK 屬絲/蘇氨蛋白質激酶抗體瑞格列奈L-纈氨乙酯鹽鹽Human IAA (Insulin Autoantibody) ELISA Kit
CK II Alpha/STK 屬絲/蘇氨蛋白質激酶抗體鹽伐昔洛韋L-纈氨乙酯鹽鹽Human ICAM4 (Intercellular Adhesion Molecule 4) ELISA Kit
CK II alpha/STK 屬絲/蘇氨蛋白質激酶抗體奧美拉唑鈉3-羧基苯磺Human IDE (Insulin Degrading Enzyme) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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