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麗春紅酸性品紅染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:30:33瀏覽次數:180次

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貨號 FS-X9957
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phospho-P70 S6 Kinase beta (Se

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:麗春紅酸性品紅染色液

英文名稱:

產品規格:100ml

貨號:FS-X9957

產品介紹:

用途:

麗春紅酸性品紅染色液是Masson三色染色的有效成分之一,主要用于肌纖維的染色,染色后呈紅色

儲存條件:室溫,避光,12個月

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

殼菌卷曲螺旋結構域蛋白43抗體Human EIF4A3 兔血栓A2(TXA2)免疫試劑盒

熱帶假絲酵母卷曲螺旋結構域蛋白46抗體Human EIF4B 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒

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梨葉殼小圓孢菌17號染色體開放閱讀框75抗體Human EIF2C1 兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒

百慕大公海橄欖菌Pelagibaca│bermudensis 質量規格:>98%,BRSH2攜帶蛋白試劑盒馬鞭草

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規格:>99.0%,BRSeryl- tRNA合成,質試劑盒牡荊油

大西洋假絲酵母Candida│atlantica 質量規格:>98%,BRSalusin Beta試劑盒馬兜鈴C
麗春紅酸性品紅染色液梅花狀青霉 3--4-氨基DPPX-IgG抗體

黃硬皮馬勃 3-硝基-1,2,4-三唑IgLON家族蛋白5抗體

阿維鏈霉 雙乙酰乙酰對苯二豬肉絳蟲

枯草芽孢桿 2-叔丁基-5-抗神經節脂抗體

絳紅產色小單胞 L-纈芐酯鹽鹽抗神經節脂抗體

紅冬孢酵母屬 甘芐酯鹽鹽抗神經節脂抗體

白靈側耳 3-(1-萘氧基)-1,2-環氧烷抗神經節脂抗體

Hyalodendriella betulae Crous  4-吡啶-2-甲甲酯抗神經節脂抗體

貪噬 十二烷基甲酯抗神經節脂抗體

香菇 6-氨基-1-甲基離子通道輔助蛋白1

不吸水鏈霉 4-乙氧基-2,3-二氟-6-胞內離子通道蛋白1

孟氏假單胞 正丁基縮水甘油磷

枯草芽孢桿 N-甲基二烯基組蛋白脫乙酰基5

相思根瘤 2,3-二溴-6-吡啶甲氧基腎上腺

植物乳桿 4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷-2-基)-1H-吲唑可溶性髓系觸發受體-2
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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