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當前位置：上海撫生實業有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> CPT1肉毒堿棕櫚酰轉移酶檢測試劑盒微量法
| 貨號 | FS-01S63551 |
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商品介紹：
測定意義 肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在于線粒體內膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉移至L-肉毒堿的反應，在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。 測定原理： 基于肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與否的條件下，通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用，產生脂酰肉堿，并釋放出巰基輔酶(COA-SH)，與Ellman試劑DN-TB反應后，產生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化（412nm），來定量分析CPT-1的活性。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
公司產品僅用于科研提供的生化試劑盒，質量信得過產品，售后完善。服務于高校及免疫學科研單位，竭誠為您提供更周到的服務更優質的產品。
規格：100管/96樣
檢測方法：微量法
貨號：FS-01S63551
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取：
1、細胞或組織樣品的制備： 培養細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
雞血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)試劑盒Anti-SRG2 AntibodyPE-Cy3標記的羊抗IgM
雞腎小球組織糖基化終末產物(GTEAGE)試劑盒 Anti-SQSTM1 AntibodyPE-CY5標記的羊抗IgM
雞絲蛋白2(PRSS2)試劑盒Anti-SRD5A1 AntibodyAPC標記的羊抗IgM
雞原纖維蛋白2(FBN2)試劑盒Anti-SRG4 AntibodyAlexa Fluor 350標記的羊抗IgM
雞球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)試劑盒 Anti-SRCIN1 AntibodyAlexa Fluor 488標記的羊抗IgM
雞尿游離皮質(UFC)試劑盒 Anti-SRI AntibodyAlexa Fluor 555標記的羊抗IgM
雞非受體酪激2(TNK2)試劑盒 Anti-SRI AntibodyAlexa Fluor 647標記的羊抗IgM
雞結蛋白(Des)試劑盒 Anti-SRP1/KPNA1 AntibodyPE-Cy5.5標記的羊抗IgM
雞前蛋白轉化枯草溶菌9(PCSK9)試劑盒 Anti-SRSF3 AntibodyPE-Cy7標記的羊抗IgM
雞羧肽E(CPE)試劑盒Anti-SSR3 AntibodyCy3標記的羊抗IgM
雞黑瘤黏附分子(MCAM)試劑盒Anti-SRY Antibody性磷（AP）標記的羊抗IgM
雞骨保護配體(OPGL)試劑盒Anti-SSTR2 Antibody辣根過氧化物標記的羊抗IgM
雞X型膠原(COL10)試劑盒Anti-SRSF1 Antibody(PB0431)辣根過氧化物標記的小鼠抗IgG
雞胃蛋白原A(PGA)試劑盒Anti-SSTR3 Antibody性磷（AP）標記的小鼠抗IgG
雞神經絲蛋白(NF)試劑盒Anti-SSX2 Antibody羅丹明標記的小鼠抗IgG
CPT1肉毒堿棕櫚酰轉移酶檢測試劑盒微量法胰島β生長因子Reg IIIα 抗體Anti-CXCL9 Antibody鮑曼不動桿圖片
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