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貨號	FS-01S63659

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：Cx內(nèi)切β1，4葡聚糖酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/48樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63659

商品介紹：

測定意義

Cx存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，Cx主要作用于非晶態(tài)纖維素和水溶性纖維素衍生物，隨機水解糖苷鍵，將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。

測定原理：

采用3,5－二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)聯(lián)免疫試劑盒棲植物潘隆尼亞湖桿Protein A (HRP Conjugate)

鳥苷環(huán)化激活因子2B(GUCA2B)聯(lián)免疫試劑盒馬褂木炭疽盤孢TEAD1 (D9X2L) Rabbit mAb

顆粒K(GZMK)聯(lián)免疫試劑盒阿姆斯特丹曲霉ATP2A1/SERCA1 (D54G12) Rabbit mAb

花生四烯脂加氧3(ALOXE3)聯(lián)免疫試劑盒蒙氏假單胞CUEDC2 Antibody

色P450家族成員26A1(CYP26A1)聯(lián)免疫試劑盒糙皮側(cè)耳FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

血紅蛋白(HB)聯(lián)免疫試劑盒暗產(chǎn)色鏈霉FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

全色C合(HCCS)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿PKR (D7F7) Rabbit mAb

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激IIα(CAMK2α)聯(lián)免疫試劑盒波羅的海萊茵海默氏PhosphoPlus® Chk2 (Thr68) Antibody Duet

Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)聯(lián)免疫試劑盒擬莖點霉Pontin/RUVBL1 Antibody

芳基硫酯B(ARSB)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希氏桿APC2 Antibody

組豐富糖蛋白(HRG)聯(lián)免疫試劑盒副豬嗜血桿Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

硫乙酰肝蛋白多糖(HSPG)聯(lián)免疫試劑盒貪噬屬Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )聯(lián)免疫試劑盒枯草芽孢桿CIN85 (D1A4) Rabbit mAb

HtrA絲肽1(HTRA1)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Thap11/Ronin Antibody

白介10受體β(IL10Rβ)聯(lián)免疫試劑盒黑曲霉CDX2 (D11D10) Rabbit mAb
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