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特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
CaMV35S基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10710 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
泡盛曲霉變種培養基: CM0077白酒和酒精的糖化用菌。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
青霉屬活性物質;退行性疾病模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0018生長條件: 28C
-1451℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
枯草芽孢桿菌生長條件: 38℃培養基: CM0099提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
釀酒酵母培養基: CM0077釀造葡萄酒。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 真空冷凍干燥法
柔嫩艾美耳球蟲用于科研模式菌株: no雞糞便提供形式: 其他安全等級: 2培養基: 0生長條件: 37
姬松茸(斜面)生長條件: 25-28℃,好氧。培養基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no 定期移植法
卷枝毛霉卷枝變型生長條件: 25℃培養基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
猴頭菌培養基: 17食用真菌提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
-1452℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
鐮孢培養基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌 真空冷凍干燥法生長條件: 28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養基: 38
涎沫假絲酵母共生微生物/魚類共生菌模式菌株: no生物樣/半滑舌鰨腸提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 513生長條件: 28℃
F3模式菌株: no安全等級: 2種屬: Candida│albicans分泌物提供形式: 凍干物培養基: CM0013生長條件: 36℃
Pt彩色豆馬勃11-2培養基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
卷枝毛霉卷枝變型生長條件: 25℃培養基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
紫萁酮Kir6.2 peptide ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 半乳糖凝集素IgG
竹紅菌甲素AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) 精氨加壓素受體2抗原 抑制型G蛋白α3IgG
竹紅菌乙素Aurora B 極光激酶B抗原 半乳糖凝集素-3IgG
紫蘇Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原) 神經生長相關蛋白-43()IgG
紫蘇烯B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽) 精神障礙相關GAP蛋白IgG
棕矢車菊素Nociceptin receptor 孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原) 3-磷甘油脫氫酶IgG
標準品Nogo-A 軸索過度生長抑制因子-A(抗原)抗體
左旋千金藤啶堿Nogo-66 1-40 Nogo-66 (1-40) 3-磷甘油脫氫酶(人)IgG
棕櫚甲酯Nogo R 軸索過度生長抑制因子受體(多肽抗原) 3-磷甘油脫氫酶(大鼠、小鼠)IgG
澤瀉A-24-醋酯Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關死亡促進因子Bad抗原 3-磷甘油脫氫酶IgG
CaMV35S基因核酸檢測試劑盒Aminoglutethimide 氨魯米特(標準品) 質量規格:>95%,PractGrade
Flutamide 氟他胺 質量規格:>95%,TechGrade
Flutamide 氟他胺(標準品) 質量規格:>95%,USP
Cyclophosphamide 環磷酰胺 質量規格:>95%,標準品
Cyclophosphamide 環磷酰胺(標準品) 質量規格:>95%,標準品,用于含量測定
DexamethasoneAcetate 醋地塞米松 質量規格:>95%,標準品用于含量測定
DexamethasoneAcetate 醋地塞米松(標準品) 質量規格:>95%,蛋白≤0.1%
Trimethoprim 甲氧芐啶 質量規格:>95%,分子生物學級
Trimethoprim 甲氧芐啶(標準品) 質量規格:>95%,分子生物學級
Sivelestatsodium 西維來司鈉 質量規格:>95%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉運蛋白(SGLT2)抑制劑
Nevirapine 奈韋拉平 質量規格:>95%,進分
Nevirapine 奈韋拉平(標準品) 質量規格:>95%,進口
Sulfamethoxazole(SMZ) 磺胺甲惡唑 質量規格:>95%,進口
Sulfamethoxazole(SMZ) 磺胺甲惡唑(標準品) 質量規格:>95%,進口
CefpiromeSulfate 硫頭孢匹羅 質量規格:>95%,進口
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