產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記    

產(chǎn)品英文：CT26+LUC

貨號：FS-01X9656

細(xì)胞培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒Human Heat Shock Protein 70，HSP-70 ELISA Kit

人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒Human Heat Shock Protein 40，HSP-40 ELISA Kit

人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒Human Heat Shock Protein 20，HSP-20 ELISA Kit

人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒Human Myosin，MYS ELISA Kit

人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒Human C-Reactive Protein，CRP ELISA Kit

人醛固(ALD)ELISA試劑盒human aldosterone，ALD ELISA Kit

人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒Human Myoglobin，MYO/MB ELISA Kit

人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒Human cardiac troponin Ⅰ，cTn-ⅠELISA Kit

人血管生長(ANG)ELISA試劑盒Human Angiogenin，ANG ELISA Kit

人血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒Human angiotension Ⅱ，ANG-Ⅱ ELISA Kit

人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒human Histocompatibility 2-K1-K region，H2-K1 ELISA Kit

人甘露糖(MN)ELISA試劑盒 Human Mannose，MN ELISA Kit

人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒 Human mannose receptor，MR ELISA Kit

人2，3-二磷甘油(2，3-DPG)ELISA試劑盒Human 2，3-Disphosphoglycerate，2，3-DPG ELISA Kit

人β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒 Human Beta-naphthol，β-Nph ELISA Kit

人凝聚(CLU)ELISA試劑盒Human clusterin，CLU ELISA Kit

人二磷腺(ADP)ELISA試劑盒Human Adenosine diphosphate，ADP ELISA Kit

人5羥基吲哚乙(5-HIAA)ELISA試劑盒Human 5-hydroxyindolacetic acid，5-HIAA ELISA Kit

人12羥二十烷四烯(12-HETE)ELISA試劑盒Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid，12-HETE ELISA Kit
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記ACE2  血管緊張轉(zhuǎn)換2抗體 0.1ml

ACEI  血管緊張1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體 0.1ml

Acetyl CoA Carboxylase  乙酰輔羧化抗體 0.2ml

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)  磷化乙酰輔羧化抗體 0.1ml

ACD  腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體 0.2ml

ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰抗體 0.1ml

Acinus  Acinus抗體 0.2ml

phospho-Acinus(Ser1180)  磷化腺泡Acinus蛋白抗體 0.1ml