產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：食管上皮細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9791

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒英文名稱：human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒英文名稱：human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒英文名稱：Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒英文名稱：Human TU3A Protein ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β(ETFB)ELISA試劑盒英文名稱：Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒英文名稱：Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒英文名稱：Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒英文名稱：Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒英文名稱：Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒英文名稱：Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 英文名稱：Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人尿相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒英文名稱：Human urease related protein C,UreC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人銜接蛋白活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 英文名稱：Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒英文名稱：Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 英文名稱：Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒英文名稱：Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
食管上皮細胞phospho-ANAPC1(Ser377)  磷化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體規(guī)格: 0.1ml

Agrin  聚集蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CENPT  著絲粒蛋白T抗體規(guī)格: 0.2ml

RanGAP1  RAN GTPase激活蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

PRC1  胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

CDCREL/SEPT5  細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1規(guī)格: 0.2ml

SEPT6  細胞分化蛋白SEPT6抗體規(guī)格: 0.2ml

Septin 8  細胞分化蛋白SEPT8抗體規(guī)格: 0.2ml