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HP亞鐵氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-12 15:48:52瀏覽次數:150次

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貨號 FS-01S63838
HP亞鐵氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法公司正在出售的產品:人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒BPE蛋白標記試劑盒(不含BPE)
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產品名稱:HP亞鐵氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法

規格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

貨號:FS-01S63838
商品介紹:

測定意義

Hephaestin (HP)作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發現的鐵轉運蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內鐵代謝。HP的表達可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調節。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導鐵的跨膜轉運中有重要作用。

測定原理:

HP催化Fe2+氧化為Fe3+,Fe2+和ferrozine反應顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品:

可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

CTBP2  C末端結合蛋白2抗體    * 0.1ml

PTGER1  前列腺EP1受體抗體    * 0.1ml

phospho-PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17)  磷化心臟磷蛋白抗體    * 0.1ml

ASM/Acid sphingomyelinase  性神經鞘磷脂抗體    * 0.1ml

IL-1 Beta/IL-1B  白介1β抗體    * 0.1ml

BFAR/RNF47  環指蛋白47抗體    * 0.2ml

WISP1  Wnt1信號通路蛋白1抗體    * 0.2ml

Annexin A8  膜粘連蛋白8抗體    * 0.1ml

CD105/Endoglin  CD105抗體    * 0.1ml

GLUT10/Glucose Transporter GLUT10  葡萄糖轉運蛋白10抗體    * 0.2ml

CD54/ICAM-1  細胞間粘附分子1抗體    * 0.1ml

Filaggrin  兜甲蛋白抗體    * 0.2ml

Sortilin/NTR3/Gp95  神經降壓受體3抗體(糖蛋白95)    * 0.2ml

IFNA16/Interferon alpha 16  干擾α16抗體    * 0.2ml

NET1  去甲轉運蛋白/神經遞質去甲轉運體抗體    * 0.2ml
HP亞鐵氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法脂肪去飽和1Anti-GPR68 Antibody大鼠c-myc癌基因產物(c-myc)elisa定量檢測試劑盒

γ1基丁偶聯血藍蛋白Anti-GPR50 Antibody大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL/TNFSF10)elisa定量檢測試劑盒

γ1基丁偶聯牛血清白蛋白Anti-GPR85 Antibody大鼠高敏甲狀腺(U-T4)elisa定量檢測試劑盒

糖原合激-3 beta(多肽)Anti-GPR75 Antibody大鼠I型前膠原基端原肽(PINP)elisa定量檢測試劑盒

熒光標記慶大霉Anti-GPR87 Antibody大鼠促甲狀腺胚胎因子(TEF)elisa定量檢測試劑盒

糖原合激-3α (多肽)Anti-GPR82 Antibody大鼠血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)elisa定量檢測試劑盒

磷化糖原合激-3β (多肽)Anti-GPR87 Antibody大鼠周期A1(CCNA1) elisa定量檢測試劑盒

磷化糖原合激3α/β抗原Anti-GPRC5A Antibody大鼠信號傳導轉錄激活因子3(STAT3)elisa定量檢測試劑盒

 


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