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超氧陰離子清除能力檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 12:52:31瀏覽次數:161次

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貨號 FS-01S63347
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產品名稱:超氧陰離子清除能力檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63347
商品介紹:

測定意義

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體

小鼠性別決定區Y框蛋白3(SOX3) 試劑盒Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit肉棕櫚酰基轉移2抗體

小鼠性結合球蛋白(SHBG)試劑盒Human KL(Klotho) ELISA Kit肉氧位甲基轉移抗體

小鼠唾液結合球蛋白樣凝集3(SIGLEC3) 試劑盒Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitIV型膠原α3結合蛋白抗體

小鼠唾液結合球蛋白樣凝集12(SIGLEC12)試劑盒 Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit肉棕櫚酰基轉移1B抗體

小鼠信號識別顆粒(SRP10)試劑盒Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit膽27α羥化抗體

小鼠信號轉導子和轉錄激活子1(STAT1)試劑盒Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit膽24α7羥化抗體

小鼠信號轉導子和轉錄激活子2(STAT2)試劑盒Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit色P450 4A1抗體

小鼠信號轉導子和轉錄激活子3(STAT3)試劑盒Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit色P4504A22抗體(脂肪Ω羥化)

小鼠信號轉導子和轉錄激活子4(STAT4)試劑盒Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit周期蛋白依賴性激抑制劑2D抗體

小鼠信號轉導子和轉錄激活子5A(STAT5A)試劑盒Human APLN(Apelin) ELISA Kit膽24S-羥化

小鼠信號轉導子和轉錄激活子6B(STAT6B)試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit豬瘟病抗體

小鼠信號轉導子和轉錄激活子6(STAT6)試劑盒Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit色c氧化亞型2抗體

小鼠Smad同源物1(Smad1)試劑盒Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit周期G2抗體

小鼠鳥酰轉移(OCT)試劑盒Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit銅藍蛋白抗體
超氧陰離子清除能力檢測試劑盒微量法乙鈣 AR,99%3,5-二芐氧基甲 98%Anti-PEDF /FITC  熒光標記色上皮源性因子抗體IgG

乙鈣 CP,98%3-羥基-2-甲  98%Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC  熒光標記抗磷化表皮生長因子受體抗體IgG

二甲基亞砜 for HPLC, ≥99.7%2-異氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷 98%Anti-PEG3/FITC  熒光標記PEG3蛋白抗體IgG

AR,99.0%過氧化氫  3500 units/mg Anti-PEG10 /FITC  熒光標記肝癌高表達基因抗體IgG

雙乙鈉 99%干冰,塊狀,146*88*20Anti-PENK/Enkephalin A/FITC  熒光標記腦啡肽抗體IgG

乙鈉,三水 AR,99%氫氣減壓閥Anti-Peptide YY/PYY/FITC  熒光標記酪酪肽抗體IgG

乙鈉,三水 GR,99.5%芐嘧磺隆 分析標準品Anti-PEPT1/FITC  熒光標記腸道肽轉運蛋白1/小肽轉運蛋白1抗體IgG

乙鈉,三水 ACS,99.0-101%胃蛋白(豬源) 1:3000Anti-PEPT2 /FITC  熒光標記腸道肽轉運蛋白2/小肽轉運蛋白2抗體IgG


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