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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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Hoechst33342染色液(含封片劑)

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-11 16:30:58瀏覽次數(shù):181次

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貨號(hào) FS-X9883
Hoechst33342染色液(含封片劑)正在熱銷的產(chǎn)品:Integrin alpha 6/CD49f 整合α6抗體咪唑 99.5%,用于緩沖溶液
Integrin Beta 3/CD61 整合β3抗體咪唑 99.5%,用于熒光分析
JAK1 蛋白質(zhì)酪氨激JAK-1抗體咪唑 99.5%,分子生物學(xué)級(jí)
Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 化蛋白質(zhì)酪氨激JAK-1抗體咪唑

產(chǎn)品介紹:

用途:

細(xì)胞周期分析、活細(xì)胞染色等

注意事項(xiàng):

Hoechst33342是一種熒光染料,可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,6個(gè)月

中文名稱:Hoechst33342染色液(含封片劑)

英文名稱:Hoechst33342 Staining Solution

產(chǎn)品規(guī)格:10ml

貨號(hào):FS-X9883

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

藤黃短小桿菌鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷腺抗體Human MAN1A2 小鼠

蘇云金芽胞桿菌櫪木亞種精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體Human MAP4K4 小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒

南方鹽單胞菌共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體Human MAP7 小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒

疣孢鏈霉菌孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1)Human MAN2B2 小鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒

聚生殼菌脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體Human MANBAL 小鼠組織蛋白去乙酰化2(Hdac2/Yy1bp)免疫試劑盒

傳染性法氏囊病病芳香基硫酯H抗體Human MAP7 小鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒

青霉屬溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體Human MAP4K5 小鼠組蛋白脫乙酰(HDAC1)免疫試劑盒

水稻節(jié)桿菌載脂蛋白1抗體Human MANEA 小鼠組蛋白去乙酰化4(HDAC4)免疫試劑盒

暗黑鏈霉菌突觸融合結(jié)合蛋白6抗體Human MAP4K3 小鼠組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒

挪威假絲酵母精1抗體Human MALT1 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒

平滑假絲酵母腺激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) 小鼠組(HIS)免疫試劑盒

盤長(zhǎng)孢狀盤孢三磷腺結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體Human MAML3 小鼠總蛋白C(TPC)免疫試劑盒

中國(guó)臺(tái)灣假黃單胞菌磷化鈉ATPα1多肽抗體Human MAN2B2 小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒

小孢鏈霉菌Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體Human MAN1A2 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒

磚紅鐮刀菌肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體Human MANBAL 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒

大腸埃希菌脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體Human MANEA 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒

彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR表皮活化肽因子試劑盒鹽伊立替康

云芝Trametes│versicolor (L.) Lloyd 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR表皮生長(zhǎng)因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7試劑盒愈創(chuàng)木

溶血不動(dòng)桿菌基因型4Acinetobacter│haemolyticus/genospecies 4 質(zhì)量規(guī)格:AR,≥99%表皮生長(zhǎng)因子受體2試劑盒氧化石蒜堿
Hoechst33342染色液(含封片劑)灰樹花 2-氨基-5--3-吡啶,95%腎前體

根瘤 1-Boc-1-RNA結(jié)合基元蛋白8A

澳大利亞糖絲 2-氟-5-苯半胱氨酰白三烯受體

根瘤 吡啶并[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮尿皮質(zhì)

釀酒酵母 2,4,6-三氟類缺陷病抗體1+2

釀酒酵母 4--2-高密度脂蛋白2b

維羅納假單胞 6-氟-2-吡啶高密度脂蛋白2

平臍蠕孢 2-鹽乙脒鹽鹽高密度脂蛋白3

金黃色葡萄球 N,N-二甲基基硅抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgG抗體

玻利維亞鹽單胞 2-氧代環(huán)戊基乙乙酯抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgM抗體

草生鏈霉 1,4-二氮雜-5-環(huán)庚酮鹽鹽Flag標(biāo)簽

金頂側(cè)耳、榆黃磨、金頂磨 1-芐基-4-酮鹽鹽角蛋白19片段

葡萄座腔 Cbz-O-芐基-L-絲生長(zhǎng)因子

適宜劍 4-溴-2,5-二氟苯磺酰糖原合成激3β

雞樅(雞) 雷瑣太爾促甲狀腺受體

 


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