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貨號(hào)	FS-01S63240

商品介紹：

測(cè)定意義

NADPase主要存在于植物組織中，是生物體內(nèi)催化NADP+降解為NAD+的酶，與NADK一起調(diào)控NAD和NADP之間的平衡。

測(cè)定原理：

NADPase能夠催化NADP+水解為NAD+和無(wú)機(jī)磷的反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)測(cè)定NADPase活性。

所需的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：NADPaseNADP磷酸酶檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63240
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

豬回腸脂肪結(jié)合蛋白6(FABP6)聯(lián)免疫試劑盒日本曲霉GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb

豬絲裂原活化蛋白激14(MAPK14)聯(lián)免疫試劑盒乳乳球乳亞種GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb

豬高分子量角蛋白(CK-HMW)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Mono-Methyl Arginine [mme-R] MultiMab™ Rabbit mAb mix (HRP Conjugate)

豬解旋樣轉(zhuǎn)錄因子(HLTF)聯(lián)免疫試劑盒費(fèi)氏檸檬桿Cofilin (D3F9) XP® Rabbit mAb

豬法尼基二磷法尼基轉(zhuǎn)移1(FDFT1)聯(lián)免疫試劑盒豌豆根瘤Cofilin (D3F9) XP® Rabbit mAb

豬抗載脂蛋白A1抗體(Apo A1-Ab)聯(lián)免疫試劑盒檸檬明串珠Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

豬Ⅰ型膠原α1(COL1α1)聯(lián)免疫試劑盒貝形側(cè)耳Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α)

豬硫氧還蛋白還原1(TrxR1)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Mouse Tumor Necrosis Factor-α (mTNF-α)

豬促性腺釋放(GnRH)聯(lián)免疫試劑盒泡盛曲霉Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)

豬碳酐I(CA1)聯(lián)免疫試劑盒黑曲霉TRIM29/ATDC Antibody

豬生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/NAP3)聯(lián)免疫試劑盒慢生根瘤Phospho-IRF-7 (Ser471/472) Antibody

豬彈性蛋白4(ELA4)聯(lián)免疫試劑盒狹截盤(pán)多毛孢IDO (D8W5E) Rabbit mAb

豬纖連蛋白富亮跨膜蛋白2(FLRT2)聯(lián)免疫試劑盒解脂假絲酵母Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

豬周期依賴性激1(CDK1)聯(lián)免疫試劑盒解蛋白奇異球TBK1/NAK (E9H5S) Mouse mAb

豬內(nèi)皮抑制(ES)聯(lián)免疫試劑盒南節(jié)桿Phospho-CARD11 (Ser652) Antibody
NADPaseNADP磷酸酶檢測(cè)試劑盒微量法中心體蛋白CEP120抗體Human WNT10A(Protein Wnt-10a) ELISA Kit植物D3（VD3）ELISA試劑盒,

中心體蛋白CEP128抗體Human RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) ELISA Kit*李斯特氏顯色培養(yǎng)基

中心體蛋白CEP170抗體Human PREX2(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 2 protein) ELISA KitTCBS瓊脂

尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human PIM3(Serine/threonine-protein kinase pim-3) ELISA Kit黃芪甲苷 Astragaloside IV

銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白CUTC抗體Human ZFP36(Tristetraprolin) ELISA KitG418硫鹽

CUTL1蛋白抗體Human PORCN(Probable protein-cysteine N-palmitoyltransferase porcupine) ELISA Kit3-吲哚乙鈉

胱抗體Human GDF1(Embryonic growth/differentiation factor 1) ELISA Kit2′-脫氧胞苷-5′

胰凝乳蛋白B抗體Human TIRAP(Toll/interleukin-1 receptor domain-containing adapter protein) ELISA Kit酞絡(luò)合指示劑