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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP

參  考  價(jià):5000
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 5000元 50件可售

更新時(shí)間:2024-08-09 10:57:31瀏覽次數(shù):255次

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貨號(hào) AXB10719 規(guī)格 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP公司正在出售的產(chǎn)品:OVK18:OVK18 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞;BHK TUHR14TKB:TUHR14TKB RM1:RM-1 MLO-Y4:MLOY4 4T1-LUC-EGFP:4T1LUCEGFP

公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品介紹:

產(chǎn)品名稱

人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP

貨號(hào)

AXB10719

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

英文名

A375-LUC-EGFP

分類

人細(xì)胞系

用途

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

 


人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP


細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1)  細(xì)胞的收獲
用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬(wàn) 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2)  保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4)  儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。

人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)

A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無(wú)血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。

公司正在出售的產(chǎn)品:

大鼠髓鞘關(guān)聯(lián)糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒 ,英文名: MAG ELISA Kit

Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒

raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體規(guī)格:48T/966"}

小鼠去甲(NE)ELISA試劑盒 ,英文名: NE ELISA Kit

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 96T/48T

人鈣激活1(CAPN1)免疫試劑盒 Human calpain 1,CAPN1 ELISA Kit

RatIerleukin11,IL-11ELISAKit大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

CASPASE-4蛋白表達(dá)E6"}

豚鼠25羥基3(25 HVD3)ELISA試劑盒 ,英文名: 25 HVD3 ELISA Kit

Human pulmonary surfacta associated protein B (SP-B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒

rabbittelomerase,TEELISAKit 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBDNF(MouseBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit6"}

人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒

Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanapelin12,AP12ELISA試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi規(guī)格:96T/48T

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑6"}


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