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吉姆薩染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 15:01:13瀏覽次數:188次

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貨號 FS-X9784
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產品介紹:

本品以進口的吉姆薩色素、甲醇為主要原料,含*襯染劑,經研磨配制而成,能呈現出清晰的細胞染色效果。經常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。吉姆薩染色液由吉姆薩貯存液(10×)和磷酸鹽緩沖液組成,10×貯存液可以單獨使用,也可以1:9混合成工作液后使用。

吉姆薩色素是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。吉姆薩染色原理和結果與瑞氏染色基本相同,吉姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對細胞核著色偏深,核結構顯色不佳,故吉姆薩染液常與瑞氏染液聯合使用。

一、一步法涂片染色

1、吉姆薩工作液的配制:

按吉姆薩貯存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:9混合,即取1份吉姆薩儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為吉姆薩工作液,該工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、常規方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分鐘。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。

4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

5、干燥、鏡檢。

6、染色結果:

嗜酸性顆粒————粉紅色;

嗜堿性顆粒————紫藍色;

中性顆粒—————淡紫色

二、兩步法涂片染色

1、吉姆薩工作液的配制:

按吉姆薩貯存液(10×):蒸餾水=1:4混合,即取1份的吉姆薩貯存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻,即為吉姆薩工作液。吉姆薩工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、常規方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。

4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動載玻片,室溫靜置。

5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。

中文名稱:吉姆薩染色液

英文名稱:Giemsa Stain Solution

產品規格:100ml

貨號:FS-X9784

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

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賴酰氧化(LOX)英文名:LOX 神經表面蛋白F3包裝1g

tRNA合成(KARS)英文名:KARS 組織蛋白C抗體包裝5g

NADH脫氫1(NQO1)英文名:NQO1 半胱蛋白蛋白-4抗體包裝100g

: HBUM71385資源名稱: 鏈霉菌 質量規格:>98%,含量測定中心體蛋白350kDa試劑盒紫草;lithospermic aci

干酪乳桿菌Lactobacillus│casei 質量規格:> 99%,喜樹提取中華肝吸蟲試劑盒紫堇靈;(+)-corynoline

豬鏈球菌Streptococcus│suis 質量規格:HPLC≥99%,標準品制瘤M受體試劑盒紫杉肽;
吉姆薩染色液蘇云金芽孢桿 3--5-甲基-4-載脂蛋白C1

淡青鏈霉 2-(二氟甲氧基)載脂蛋白C2

香菇 二甲基烯乙二酯載脂蛋白C3

黃色短桿 異丁香茅酯載脂蛋白E

三葉草根瘤 異丁正丁酯載脂蛋白E4

大腸埃希氏 一硫化四甲基秋蘭姆載脂蛋白J

果生鏈核盤 三丁基(1-乙氧基乙烯)錫再生胰島衍生1α;胰石蛋白;胰線蛋白

Paracoccus 坎利酮早期分泌抗原靶6

異常漢遜酵母 4-溴二苯并噻吩增殖核抗原抗體

露濕漆斑 2-基-3-氟吡啶粘蛋白;粘液5B

玫瑰色紅球 5--2,4-二甲氧基苯粘蛋白1

巨獸芽孢桿 5-溴-2-基吡啶粘蛋白17

肺炎鏈球 芐星頭孢匹林粘蛋白2

地衣芽孢桿 6-乙氧基煙粘蛋白5AC

清酒假絲酵母 6-乙氧基煙堿粘蛋白7

 


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