當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPT人百日咳毒素ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | PT人百日咳毒素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Pertussiu Toxin, PT Elisa Kit |
貨號 | FS-H63546 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Gluconacetobacr│hansenii 漢氏葡糖醋桿菌Gluconacetobacr│hansenii凍干物安全等級:1模式菌株:noproduces 17-beta-hydroxysroid dehydrogenase produces 3-hydroxysroid dehydrogenase 3-beta-hydroxysroid dehydrogenase33生長條件:26℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99%
Lactobacillus│rossiae 羅氏乳桿菌Lactobacillus│rossiae凍干物安全等級:1模式菌株:noType strain33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Aeromonas│punctata subsp. caviae 斑點氣單胞菌豚鼠亞種Aeromonas│punctata subsp. caviae凍干物安全等級:1模式菌株:no培養基:KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;鉀鈉 20g;瓊脂 20g441存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Micromonospora│peucetia 阿普利亞單孢菌Micromonospora│peucetia凍干物安全等級:1模式菌株:no培養基:NH4Cl 0.535g;KH2PO4 0.054g;KCl 0.074g;MgSO4.7H2O 0.049g;CaCl2.2H2O 0.147g;NaCl 0.584g;0.05%甲酚紅溶液 1ml;微量元素液 1ml;PH7.0-8.0,適7.8,用0.5gCaCO3或11.9gHEPES調;瓊脂 20gA4生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Aquaspirillum│arcticum 北螺菌Aquaspirillum│arcticum凍干物安全等級:1模式菌株:noR2A生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Sphingomonas│melonis 瓜類鞘氨醇單胞菌Sphingomonas│melonis凍干物安全等級:1模式菌株:noR2A生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Leptothrix│discophora 盤狀纖發菌Leptothrix│discophora凍干物安全等級:1模式菌株:noR2A生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae 蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae凍干物安全等級:1模式菌株:no2生長條件:30-32℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
PT人百日咳毒素ELISA試劑盒實驗原理GSK-3 Beta (CT) 葡萄糖合成激酶-3β抗體地蜈蚣N-乙酰-D-氨Human MF/MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit
phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 磷化葡萄糖合成激酶3β抗體錦燈籠N-乙酰-D-氨Human PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain ) ELISA Kit
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) 磷化葡萄糖合成激酶3β抗體藁本(藁本)N-乙酰-D-氨Human FABP7 (Fatty Acid Binding Protein 7, Brain) ELISA Kit
phospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216) 磷化葡萄糖合成激酶3α/β抗體藁本(遼藁本)2(2-吡)Human MAOA (Type A Monoamine Oxidase) ELISA Kit
GSK-3 Beta (NT) 糖原合酶激酶-3β抗體薤白(根蒜)2(2-吡)Human MCP-2/CCL8 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
GST tag GST標簽蛋白抗體鶴虱2(2-吡)Human MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit
/GLUR 谷胱甘肽還原酶抗體蟾酥3-羥基苯甲甲酯Human GPER1 (G Protein Coupled Estrogen Receptor 1) ELISA Kit
GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三磷鳥苷環水解酶抗體松葉3-羥基苯甲甲酯Human PRDX1 (Peroxiredoxin 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。