當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
貨號 | FS-X9591 |
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操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit | 1000T | FS-X9591 |
產品介紹:
CFSE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細胞增殖檢測和細胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細胞增殖檢測方法。 基于CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標記獲得的檢測結果*一致,但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次、2次或更多次數,同時如果和其它熒光探針聯用,可以獲取不同分裂次數細胞的其它相關信息。 CFDA SE 的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47。CFDA SE可以通透細胞膜,進入細胞后可以被細胞內的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內蛋白的Lysine殘基或其它氨基發生結合反應,并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩定,穩定標記的時間可達數個月。CFSE標記細胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。 由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩定,每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞,分裂一次的細胞(1/2的熒光強度),分離兩次的細胞(1/4的熒光強度),分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數的細胞。 CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測,甚至還可以用于細菌增殖的檢測。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
血管內皮生長因子165(VEGF165)檢測試劑盒 forVascularEndothelialGrowthFactor165(VEGF165)
突觸融合蛋白17(STX17)檢測試劑盒 forSyntaxin17(STX17)
蛋白激meiBγ(PKBγ)檢測試劑盒 forProteinKinaseBGamma(PKBg)
腎損傷分子1(Kim1)檢測試劑盒 forKidneyInjuryMolecule1(Kim1)
基質金屬蛋白mei13(MMP13)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase13(MMP13)
肌糖δ(SGCδ)檢測試劑盒 forSarcoglycanDelta(SGCd)
亮氨suan豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測試劑盒 forLeucineRichAlpha-2-Glycoprotein1(LRG1)
叉頭框蛋白O1(FOXO1)檢測試劑盒 forForkheadBoxProteinO1(FOXO1)
TATA框結合蛋白關聯因子2(TAF2)檢測試劑盒 forTATABoxBindingProteinAssociatedFactor2(TAF2)
轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorAlpha(TGFa)
肝配蛋白A4(EFNA4)檢測試劑盒 forEphrinA4(EFNA4)
轉化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta2(TGFb2)
胰島su樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)檢測試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein4(IGFBP4)
羧肽meiA3(CPA3)檢測試劑盒 forCarboxypeptidaseA3,MastCell(CPA3)
硒磷suan合成mei1(SEPHS1)檢測試劑盒 forSelenophosphateSynthetase1(SEPHS1)
C反應蛋白(CRP)檢測試劑盒 forCReactiveProtein(CRP)
溶質載體家族30成員7(SLC30A7)檢測試劑盒 forSoluteCarrierFamily30Member7(SLC30A7)
CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒噻康zuo相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:Tioconazole Related Compound A
乙酰半胱氨suan標準品 規格:200mg 英文名稱:Acetylcysteine
jia芬那suanjia芬那suan標準品 規格:200mg 英文名稱:Mefenamic Acid
來fumi特相關物質C標準品 規格:10mg 英文名稱:
糖精鈉標準品 規格:100mg 英文名稱:Saccharin Sodium
土霉su標準品 規格:200mg 英文名稱:Oxytetracycline
沙利鉑相關物質A標準品 規格:100mg 英文名稱:
鹽suan阿的平標準品 規格:200mg 英文名稱:Quinacrine Hydrochloride
槲皮su標準品 規格:500mg 英文名稱:Quercetin
鹽suan普魯卡因an標準品 規格:200mg 英文名稱:Procainamide Hydrochloride
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