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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法
| 貨號 | FS-01S63489 |
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商品介紹：
測定意義 PK（EC 2.7.1.40）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化糖酵解過程中的最后一步反應(yīng)，是糖酵解過程中的主要限速酶之一，也是產(chǎn)生ATP的關(guān)鍵酶之一，因此測定PK活性具有重要意義。 測定原理 PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脫氫酶進(jìn)一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PK活性。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱：PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
貨號：FS-01S63489
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
粗酶液提取：
1、細(xì)胞或組織樣品的制備： 培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
綿羊組織多肽抗原(TPA)聯(lián)免疫試劑盒筑波擬酵母Mouse TRF (Transferrin) ELISA Kit
綿羊二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰(DLAT)聯(lián)免疫試劑盒膠孢M(jìn)ouse TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2) ELISA Kit
綿羊C型凝集結(jié)構(gòu)域家族2成員C(CLEC2C)聯(lián)免疫試劑盒 弗雷德里克斯堡假單胞Mouse TFR (Transferrin Receptor) ELISA Kit
綿羊核孔蛋白35kda(NUP35)聯(lián)免疫試劑盒微小鏈霉Mouse TGFbI (Transforming Growth Factor Beta Induced) ELISA Kit
綿羊煙酰腺二核苷磷氧化5(NOX5)聯(lián)免疫試劑盒彩色豆馬勃Mouse TGF-α (Transforming Growth Factor α) ELISA Kit
綿羊T急性母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)聯(lián)免疫試劑盒擴(kuò)展青霉Mouse TGFb2 (Transforming Growth Factor Beta 2) ELISA Kit
綿羊胰蛋白原II(Try2)聯(lián)免疫試劑盒 巴斯德畢赤酵母Mouse TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit
綿羊上皮型鈣粘蛋白 (E-Cad)聯(lián)免疫試劑盒 蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種Mouse TGF-β4 (Transforming Growth Factor β4) ELISA Kit
綿羊谷脫羧1(GAD1)聯(lián)免疫試劑盒斑污擬盤多孔孢M(jìn)ouse TG (Transglutaminase) ELISA Kit
綿羊促睡眠肽α(δSIP-α)聯(lián)免疫試劑盒 灰平鏈霉Mouse TMED1 (Transmembrane Emp24 Domain Containing Protein 1) ELISA Kit
綿羊β淀粉樣前體蛋白(βAPP)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Mouse TNPO1 (Transportin 1) ELISA Kit
綿羊腦多巴神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)聯(lián)免疫試劑盒 淡紫擬青霉Mouse TTR (Transthyretin) ELISA Kit
綿羊胰腺再生蛋白1α(REG1α)聯(lián)免疫試劑盒費比恩畢赤酵母Mouse TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit
綿羊VIII型膠原α1(COL8α1)聯(lián)免疫試劑盒 匍匐曲霉Mouse TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal) ELISA Kit
綿羊踝蛋白(TLN)聯(lián)免疫試劑盒Rhodobacter vinaykumariiMouse TNNI3/cTn-I (Troponin I Type 3, Cardiac) ELISA Kit
PK丙酮酸激酶檢測試劑盒微量法錫 AR,99.5%甲中氯代類混合標(biāo)樣氯代類:氯、1, 2－二氯、1, 4－二Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗體IgG
錫 AR,100目一氯二溴標(biāo)準(zhǔn)溶液分析標(biāo)準(zhǔn)品,溶劑:甲Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化Bcl-10抗體IgG
錫 SP氯代類：氯、1,2－二氯、1,3－二氯、1,4－二氯、1,2,4Anti-Bcr/CD3D/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T受體抗體IgG
錫 99.99% metals basis鄰二甲二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：甲Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化T受體抗體IgG
高純錫 99.999% metals basis，1-6mm，顆粒鄰二甲二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液5000μg/ml，溶劑：甲Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光標(biāo)記三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體IgG
錫 99.9999%鄰二甲二丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液200μg/ml，溶劑：甲Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 熒光標(biāo)記緩激肽B2受體抗體IgG
錫 99.99999%2,6-二甲標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：甲Anti-BDNF/FITC 熒光標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgG
1,1,2-三氯乙烷 99%對二氯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：甲Anti-BECN1/FITC 熒光標(biāo)記一種抑癌基因抗體IgG
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