產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：甲狀腺成纖維細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9828

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠促性腺釋放受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor antibody,GNRHR-Ab ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠血管性血友病因子裂解蛋白(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒英文名稱：Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat major basic protein,MBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠嗜性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠鈣調(diào)磷(CaN)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat calcineurin,CaN ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠堿性磷(ALP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠血管生成4(ANG-4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠乙脫氫(ADH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠乙醛脫氫(ALDH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble cluster of differentiation 14,sCD14 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管(MIS/AMH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠雄(androgen)ELISA試劑盒英文名稱：Rat androgen ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
甲狀腺成纖維細胞RRAS  原癌基因R-Ras抗體規(guī)格: 0.2ml

SEC14 like protein 2/Squalene transfer protein  αE相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

SEN1/  細胞衰老相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

SLC25A6  線粒體載體腺核轉(zhuǎn)運蛋白6抗體規(guī)格: 0.2ml

SODD  Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

TXNDC5  硫氧還蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

ZFAND5  AN1型鋅指蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1  甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml